Perbezaan antara ELISA langsung dan tidak langsung
Perbezaan utama - ELISA tidak langsung langsung
Immunoassay berkaitan enzim (ELISA), yang juga dikenali sebagai enzim immunoassay, adalah ujian serologi yang mengesan antibodi dalam darah. Ia digunakan sebagai alat diagnostik untuk mengetahui sama ada pesakit telah terdedah kepada jenis virus tertentu atau agen berjangkit lain (antigen) dan sama ada badan telah menghasilkan antibodi terhadap jangkitan. ELISA juga dapat mengenal pasti jangkitan masa lalu dan semasa. Oleh itu, ELISA sering digunakan sebagai ujian prescreening oleh doktor sebelum analisis penyakit yang mendalam. Ujian ini boleh dilakukan di makmal dengan mengambil sampel darah dari pesakit. Terdapat dua jenis ujian ELISA: ELISA langsung dan ELISA tidak langsung. Perbezaan utama antara ELISA langsung dan tidak langsung ialah ELISA tidak langsung lebih sensitif dan memerlukan penambahan antibodi sekunder manakala Elisa langsung kurang sensitif dan hanya menggunakan antibodi utama.
Kandungan
1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apa itu Elisa Langsung
3. Apa itu ELISA tidak langsung
4. Perbandingan sampingan - Langsung vs ELISA tidak langsung
5. Ringkasan
Apa itu Elisa Langsung?
ELISA adalah ujian diagnostik penyakit yang dilakukan untuk mengenal pasti kehadiran antigen atau antibodi tertentu dalam darah. Ia dilakukan sebagai ujian plat. Ia menggunakan antibodi yang dikaitkan dengan enzim yang mudah diuji. Kehadiran antigen dalam sampel serum mengikat dengan antibodi tertentu yang dikaitkan dengan enzim. Dalam langkah terakhir, substrat tertentu ditambah untuk bertindak balas dengan enzim. Enzim menukarkan substrat menjadi produk yang menghasilkan berwarna atau isyarat. Perubahan warna dalam substrat kimia mendedahkan kehadiran antibodi tertentu dalam sampel serum. Ujian ELISA Langsung hanya menggunakan antibodi utama yang dikaitkan dengan enzim. Apabila mengikat antigen, ia dengan cepat mengubah warna, menunjukkan kehadiran ejen berjangkit dalam darah. Walau bagaimanapun, intensiti isyarat lebih lemah dalam ELISA langsung sejak epitopes terhad kepada pengikatan antigen. Oleh itu, ELISA langsung kurang sensitif berbanding ELISA tidak langsung.
Rajah 01: Ujian ELISA langsung
Apa itu ELISA tidak langsung?
ELISA boleh dilakukan menggunakan dua jenis antibodi iaitu; antibodi utama dan antibodi sekunder. Alat ELISA tidak langsung menggunakan kedua -dua jenis antibodi untuk menguatkan isyarat untuk pengesanan yang lebih baik. Teknik ELISA tidak langsung dilakukan seperti berikut.
- Plat diinkubasi dengan antigen dan dibasuh untuk menyekat pengikatan tidak spesifik.
- Kemudian antibodi utama ditambah dan dibasuh.
- Antibodi sekunder yang berkaitan dengan enzim ditambah dan dibasuh.
- Substrat ditambah dan dibenarkan bertindak balas dengan enzim.
- Isyarat dikesan, dan kehadiran atau ketiadaan antigen tertentu dalam sampel dikenalpasti.
Dalam ujian ELISA tidak langsung, beberapa antibodi sekunder boleh mengikat satu antibodi utama. Antibodi sekunder dikaitkan dengan enzim yang mudah diuji. Oleh itu, satu mengikat boleh membuat isyarat yang kuat kerana lebih daripada satu interaksi. Oleh itu, ELISA tidak langsung lebih sensitif daripada ELISA langsung. Walau bagaimanapun, ELISA tidak langsung boleh membuat isyarat tidak spesifik kerana reaksi silang antibodi sekunder.
Rajah 02: Ujian ELISA tidak langsung
Apakah perbezaan antara ELISA langsung dan tidak langsung?
Langsung vs ELISA tidak langsung | |
| ELISA langsung kurang sensitif berbanding ELISA tidak langsung. | ELISA tidak langsung lebih sensitif. |
| Masa yang diambil | |
| Ujian Elisa Langsung adalah proses yang cepat. | ELISA tidak langsung memakan masa. |
| Penggunaan antibodi | |
| Hanya satu jenis antibodi (antibodi utama) yang digunakan secara langsung ELISA. | Antibodi primer dan sekunder digunakan untuk ELISA tidak langsung. |
| Pautan dengan enzim | |
| Antibodi utama dikaitkan dengan enzim. | Antibodi sekunder dikaitkan dengan enzim. |
| Silang reaktiviti antibodi kedua | |
| ELISA langsung menghapuskan reaktiviti silang antibodi kedua. | ELISA tidak langsung terjejas dengan reaktiviti silang antibodi kedua. |
| Isyarat | |
| Isyarat lemah berbanding ELISA tidak langsung. | Isyarat dikuatkan dalam ELISA tidak langsung. Oleh itu, mudah untuk mengesan. |
Ringkasan -ELISA tidak langsung langsung
ELISA adalah teknik biokimia yang digunakan terutamanya dalam imunologi untuk mengesan kehadiran antibodi atau antigen dalam sampel darah pesakit. Ia boleh dilakukan melalui dua proses yang dikenali sebagai ELISA langsung atau tidak langsung. Ujian ELISA langsung hanya menggunakan antibodi utama untuk mengesan antigen sementara ELISA tidak langsung menggunakan antibodi primer dan menengah. Secara langsung ELISA, antibodi utama dilabelkan manakala dalam antibodi sekunder ELISA tidak langsung dilabelkan. Ini adalah perbezaan antara ELISA langsung dan tidak langsung.
Rujukan
1."Ujian imunosorben yang berkaitan dengan enzim (ELISA)."Buletin Pertubuhan Kesihatan Sedunia. U.S. Perpustakaan Perubatan Negara, 1976. Web. 29 Mac. 2017
2. Loon, a. M van, j. T van der logt, f. W. Heessen, dan J. Van der Veen. "Ujian imunosorben yang berkaitan dengan enzim yang menggunakan antigen berlabel untuk mengesan immunoglobulin M dan antibodi dalam toxoplasmosis: perbandingan dengan immunofluorescence tidak langsung dan enzim enzim yang berkaitan dengan enzim double."Jurnal Mikrobiologi Klinikal. U.S. Perpustakaan Perubatan Negara, Jun 1983. Web. 29 Mac. 2017
Ihsan gambar:
1. "Diagram Elisa" oleh Cavitri - Kerja Sendiri (CC oleh 3.0) melalui Commons Wikimedia
2. "ELISA tidak langsung" oleh Cawang - Kerja Sendiri (CC0) melalui Commons Wikimedia
