Perbezaan antara nitrocellulose dan pvdf
Perbezaan utama - nitrocellulose vs pvdf
Pembengkakan Barat adalah kaedah yang membolehkan pengesanan dan kuantifikasi protein tertentu dari sampel protein. Kebolehpercayaan teknik bergantung kepada pemilihan membran yang betul untuk penyerapan protein dari gel. Terdapat pelbagai jenis membran microporous. Membran Nitrocellulose dan PVDF adalah dua membran seperti yang disukai oleh penyelidik kerana sifat -sifat khas mereka terhadap jenis membran lain. Pemilihan antara nitrocellulose atau pvdf juga merupakan satu lagi cabaran dalam pembengkakan barat. Kedua -dua nitrocellulose dan PVDF mempunyai kapasiti penyerapan protein yang tinggi. Perbezaan utama antara membran nitrocellulose dan PVDF ialah Membran nitrocellulose tidak mempunyai keupayaan untuk melepaskan antibodi dan menggunakan semula membran untuk antibodi yang menindas sementara membran PVDF telah melucutkan dan menggunakan semula kemampuan.
Kandungan
1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apa itu nitrocellulose
3. Apa itu PVDF
4. Perbandingan sampingan - nitrocellulose vs pvdf
5. Ringkasan
Apa itu nitrocellulose?
Nitrocellulose adalah polimer yang dihasilkan dengan merawat selulosa dengan asid nitrik dan digunakan untuk membuat membran mikroporus dalam biologi molekul, terutamanya untuk teknik pembengkakan seperti selatan, utara dan barat. Saiz liang membran nitrocellulose berkisar antara 3 hingga 20 μm. Membran mikroporus nitrocellulose memudahkan pengesanan tindak balas imunokimia yang berlaku di permukaan membran. Oleh itu, membran nitrocellulose sering digunakan untuk immobilisasi protein dan pengesanan protein tertentu di barat pembengkakan. Membran nitrocellulose juga boleh melonggarkan glikoprotein dan asid nukleik.
Membran nitrocellulose lebih disukai dalam ujian aliran sisi kerana beberapa ciri. Membran nitrocellulose menyerap protein pada kepekatan yang tinggi. Pelarut yang digunakan untuk membasuh membran tidak mengurangkan penyerapan protein membran nitrocellulose. Membran nitrocellulose dapat dengan mudah dipotong ke saiz gel yang dikehendaki dan pemindahan protein dari gel ke membran oleh pemindahan elektrik atau kapilari. Nitrocellulose membolehkan aliran protein yang lebih cepat melalui membran dengan potensi mengikat yang tinggi. Nitrocellulose menunjukkan kekuatan pengendalian yang lebih baik. Satu lagi sifat khas membran nitrocellulose adalah bahawa ia dapat dengan mudah dilekatkan dengan pelekat tahan air yang tidak melanda ke pelbagai backing plastik.
Rajah 01: Membran nitrocellulose untuk pembengkakan barat
Apa itu PVDF?
Polyvinylidene difluoride (PVDF) adalah fluoropolimer yang dihasilkan oleh pempolimeran vinilidena difluorida dan mempunyai keupayaan immobilisasi yang tinggi terhadap protein. Oleh itu, membran microporous yang dibuat dari PVDF digunakan dalam teknik pembengkakan Barat untuk menganalisis protein tertentu dari campuran protein. Membran PVDF juga boleh digunakan untuk analisis asid amino dan penjujukan protein. Ciri yang paling penting dalam membran PVDF ke atas membran nitrocellulose adalah bahawa ia dapat dengan mudah dilucutkan antibodi dan digunakan semula untuk probe antibodi berikutnya.
Membran PVDF lebih tebal daripada membran nitrocellulose; Oleh itu, lebih tahan terhadap ganti rugi semasa digunakan semula. Membran PVDF sangat hidrofobik. Oleh itu, mereka mesti direndam dalam metanol atau isopropanol sebelum digunakan.
Apakah perbezaan antara nitrocellulose dan PVDF?
Nitrocellulose vs PVDF | |
| Nitrocellulose adalah polimer yang terdiri daripada selulosa. | PVDF adalah fluoropolimer yang dihasilkan oleh pempolimeran vinilidena difluorida. |
| Saiz liang membran | |
| Saiz liang biasa adalah 0.1, 0.2 atau 0.45μ | Saiz liang biasa adalah 0.1, 0.2 atau 0.45μm |
| Kapasiti mengikat protein | |
| Nitrocellulose mempunyai kapasiti mengikat protein sebanyak 80 hingga 100 μg/cm2. | PVDF mempunyai kapasiti mengikat protein 170 hingga 200 μg/cm2. |
| Kepekaan | |
| Ini mempunyai kepekaan yang rendah berbanding PVDF. | Ini mempunyai kepekaan yang tinggi. |
| Pengesanan protein yang dinyatakan dengan rendah | |
| Oleh kerana kepekaannya rendah dalam membran nitrocellulose, ia tidak sesuai untuk mengesan protein yang dinyatakan dengan rendah. | Ini lebih sesuai untuk mengesan protein yang dinyatakan dengan rendah kerana sensitiviti yang tinggi. |
| Bunyi latar belakang | |
| Ini mempunyai bunyi latar belakang yang lebih rendah | Ini mempunyai bunyi latar belakang yang lebih tinggi. |
| Interaksi dengan protein | |
| Molekul protein mengikat membran nitrocellulose melalui interaksi hidrofobik. | Protein mengikat membran PVDF melalui interaksi hidrofobik dan dipole. |
| Sifat membran | |
| Nitrocellulose rapuh dan rapuh. Walau bagaimanapun, versi nitrocellulose tersedia, dan mereka tahan. | PVDF lebih tahan lama dan mempunyai rintangan kimia yang lebih tinggi. |
| Keupayaan untuk melucutkan dan menggunakan semula | |
| Nitrocellulose mungkin mengalami kesukaran untuk melucutkan dan menghina tanpa kehilangan isyarat. | PVDF sangat sesuai untuk mengulangi aplikasi. |
| Kesesuaian | |
| Nitrocellulose sangat sesuai untuk mengesan protein berat molekul rendah. | PVDF lebih sesuai untuk mengesan protein berat molekul yang lebih tinggi. |
| Kegunaan lain | |
| Nitrocellulose boleh digunakan untuk analisis asid nukleik dan dot/slot blotting. | PVDF boleh digunakan untuk penjujukan protein dan sistem ujian fasa pepejal. |
| Kos | |
| Ini lebih murah daripada membran PVDF. | Ini lebih mahal daripada membran nitrocellulose. |
| Keperluan untuk pra-basah | |
| Membran nitrocellulose tidak memerlukan presoaking dengan metanol | Membran PVDF memerlukan presoaking dengan metanol. |
Ringkasan -Nitrocellulose vs PVDF
Membran Nitrocellulose adalah membran pertama yang digunakan secara komersil untuk ujian aliran sisi. Mereka mempunyai kapasiti tinggi untuk menyerap protein. Oleh itu, membran nitrocellulose digunakan dalam pembengkakan barat. PVDF adalah satu lagi jenis membran yang digunakan dalam pembengkakan barat dan ia juga mempunyai kapasiti penyerapan protein yang tinggi. Kedua -dua jenis digunakan dalam pembengkakan Barat untuk analisis protein. Walau bagaimanapun, membran PVDF mempunyai atribut yang lebih istimewa, menjadikannya lebih sesuai daripada membran nitrocellulose untuk pembengkakan barat. Tetapi, membran nitrocellulose lebih sesuai untuk mengesan protein berwajaran molekul yang rendah, membran PVDF lebih sesuai untuk mengesan protein berwajaran molekul yang tinggi. Ini adalah perbezaan antara membran nitrocellulose dan PVDF.
Ihsan gambar:
1."Pemindahan Blot Barat" oleh Bensaccount di Bahasa Inggeris Wikipedia (CC oleh 3.0) melalui Commons Wikimedia
Rujukan:
1.Luque-Garcia, Jose L., Ge Zhou, Tung-Tien Sun, dan Thomas A. Neubert. "Penggunaan membran nitrocellulose untuk pencirian protein oleh spektrometri massa laser/pengionan yang dibantu oleh matriks." Kimia Analisis. U.S. Perpustakaan Perubatan Negara, 15 Julai 2006. Web. 28 Mac. 2017
2."Penanda molekul dan bioteknologi tumbuhan."Buku Google. N.p., n.d. Web. 28 Mac. 2017
3.Isnin, 8 April 2013 Tweet. "The Magic's In The Membran: Pilih dengan bijak untuk hasil Best Western Blot."Biocompare. N.p., 08 Apr. 2013. Web. 28 Mac. 2017
