Perbezaan antara primer ke hadapan dan terbalik

Perbezaan utama - ke hadapan vs primer terbalik
 

Reaksi rantai polimerase (PCR) adalah kaedah penguatan DNA yang digunakan dalam aplikasi biologi molekul. Ini adalah teknik yang biasa digunakan yang membuat berjuta -juta untuk berbilion salinan urutan DNA yang sangat berminat. Ia adalah in vitro kaedah yang dilakukan di makmal. Teknik PCR bergantung sepenuhnya kepada polimerase DNA yang dihasilkan secara komersil yang dipanggil TAQ Polimerase. Dan juga memerlukan beberapa komponen lain dan penyelenggaraan suhu yang betul. Satu komponen penting adalah primer. Primer adalah urutan DNA pendek yang direka khusus untuk urutan sasaran DNA. Mereka biasanya panjangnya 20 nukleotida. Polimerase Taq memangkinkan penambahan nukleotida ke dalam urutan nukleotida yang sudah ada. Oleh itu, primer dihidangkan sebagai titik permulaan sintesis helai baru. Taq Polymerase hanya berfungsi dalam arah 5 'hingga 3' oleh itu sintesis DNA berlaku dalam arah 5 'hingga 3' yang sama. Oleh kerana DNA terkandas berganda, dua jenis primer diperlukan dalam PCR. Mereka dikenali sebagai primer hadapan dan primer terbalik. Primer ke hadapan dan terbalik disebut berdasarkan arah pemanjangan primer dalam DNA apabila sintesis DNA berlaku. Anneal primer ke hadapan dengan helai DNA antisense dan memulakan sintesis +ve helai gen ke arah 5 'hingga 3'. Anneal primer terbalik dengan helai rasa dan memulakan sintesis helai pelengkap helai pengekodan; yang mana -ve helai gen ke arah 5''to 3 '. Ini adalah Perbezaan utama antara primer ke hadapan dan terbalik.

Kandungan

1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apa itu Primer Forward
3. Apa itu Primer Reverse
4. Persamaan antara primer ke hadapan dan terbalik
5. Perbandingan sampingan - ke hadapan vs primer terbalik dalam bentuk jadual
6. Ringkasan

Apa itu Primer Forward?

Orientasi ke hadapan adalah sintesis helai pengekodan atau helai akal gen. Polimerase Taq memangkinkan sintesis helai baru dalam arah 5 'hingga 3'. Sintesis helai pengekodan berlaku apabila primer anneal dengan noncoding atau helai antisense dan memanjang dalam arah 5 'hingga 3'.

Rajah 01: Primer ke hadapan dan terbalik

Primer yang anneals dengan helai antisense atau helai noncoding atau helai template dikenali sebagai primer ke hadapan sejak primer ke hadapan bertindak sebagai titik permulaan kepada sintesis pengekodan atau helai positif gen. Primer ke hadapan mempunyai urutan nukleotida pendek yang melengkapi ke hujung antisense 3 '. Ia hibridisasi dengan helai antisense dan memudahkan polimerase Taq untuk menambah nukleotida yang melengkapi helai templat.

Apa itu Primer Reverse?

Primer Reverse adalah urutan DNA pendek yang anneal dengan 3 'hujung helai rasa atau helai pengekodan. Primer terbalik berfungsi sebagai titik permulaan untuk mensintesis helai pelengkap urutan pengekodan atau urutan noncoding. Primer Reverse direka pelengkap ke akhir 3 'helai pengekodan. Oleh itu, ia mengepam dengan hujung pengekodan 3 'flanking dan membolehkan polimerase Taq untuk mensintesis helai antisense atau helai templat. Oleh kerana orientasinya adalah dengan cara yang terbalik, primer ini dilabelkan sebagai primer terbalik.

Kedua -dua primer terbalik dan ke hadapan adalah penting untuk pengeluaran berjuta -juta hingga berbilion salinan kawasan tertentu DNA yang disasarkan atau berminat.

Apakah persamaan antara primer ke hadapan dan terbalik?

• Kedua -dua primer ke hadapan dan terbalik diperbuat daripada oligonukleotida.
• Kedua -dua primer ke hadapan dan terbalik mempunyai urutan nukleotida pendek pelengkap ke hujung mengapit helai double DNA.
• Kedua -dua primer ke hadapan dan terbalik biasanya terdiri daripada 20 nukleotida.
• Kedua -dua primer ke hadapan dan terbalik digunakan dalam tindak balas rantai polimerase.
• Kedua -dua primer ke hadapan dan terbalik disintesis secara komersil.
• Kedua -dua primer ke hadapan dan terbalik adalah suhu stabil dan biasanya mereka mempunyai TM yang sama.
• Kedua -dua primer ke hadapan dan terbalik disebarkan dengan urutan DNA sasaran.
• Kedua -dua primer ke hadapan dan terbalik direka mengikut tindak balas PCR.
• Kedua -dua primer ke hadapan dan terbalik dihidangkan sebagai titik permulaan untuk penguatan DNA.
• Kedua -dua primer terbalik dan ke hadapan adalah penting untuk menghasilkan juta salinan kawasan tertentu yang disasarkan atau berminat dengan urutan DNA.

Apakah perbezaan antara primer ke hadapan dan terbalik?

Ringkasan -ke hadapan vs primer terbalik

Terdapat dua jenis primer yang terlibat dalam teknik PCR. Mereka maju dan terbalik primer. Berdasarkan pemanjangan primer dalam sintesis helai DNA baru, primer ini dilabel atau dinamakan. Polimerase Taq mensintesis DNA baru dalam orientasi 5 'hingga 3'. Oleh itu, primer direka sebagai pelengkap kepada 3 'hujung helai berganda. Primer ke hadapan yang memanjang dalam 5 'hingga 3' arah hibrida dengan akhir 3 'antisense atau templat atau urutan noncoding. Ia berfungsi sebagai titik permulaan untuk mensintesis urutan pengekodan. Primer terbalik yang memanjang dalam arah 5 'hingga 3' hibridisasi dengan akhir 3 'pengekodan atau nontemplate atau helai akal. Ia berfungsi sebagai titik permulaan untuk mensintesis urutan noncode. Ini adalah perbezaan antara primer ke hadapan dan terbalik.

Rujukan:

1."Primer (Biologi Molekul)."Wikipedia, Yayasan Wikimedia, 20 Feb. 2018. Terdapat di sini 
2."Reaksi rantai polimerase (PCR)."Akademi Khan. Terdapat di sini 

Ihsan gambar:

1.'Primers Revcomp melted2'by Richard Wheeler (Zephyris) - Kerja Sendiri, (CC BY -SA 3.0) melalui Commons Wikimedia