Apakah perbezaan antara Elisa dan Elispot

The Perbezaan utama Antara Elisa dan Elispot ialah ELISA adalah ujian imunosorben yang berkaitan dengan enzim yang menentukan jumlah kepekatan protein isyarat yang dirembeskan, manakala ELISPOT adalah ujian imunosorben yang berkaitan.

ELISA dan ELISPOT adalah dua ujian imunosorben yang berkaitan dengan enzim yang digunakan secara meluas dalam perubatan, patologi tumbuhan, bioteknologi dan industri farmaseutikal yang berbeza. Dalam teknik ini, analit protein dikesan oleh antibodi yang diarahkan terhadapnya. ELISA adalah assay immunosorbent berkaitan enzim yang paling popular yang digunakan di makmal. Sebaliknya, Elispot adalah ujian imunosorben yang berkaitan dengan enzim yang tidak digunakan dan bukannya ELISA tetapi digunakan sebagai tambahan kepada ELISA di makmal.

Kandungan

1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apa itu Elisa
3. Apa itu Elispot
4. Persamaan - Elisa dan Elispot
5. Elisa vs Elispot dalam bentuk jadual
6. Ringkasan - Elisa vs Elispot

Apa itu Elisa Assay?

ELISA adalah ujian imunosorben yang berkaitan dengan enzim yang menentukan jumlah kepekatan protein yang dirembeskan. Ini adalah ujian biokimia analisis yang digunakan secara meluas yang pertama kali digambarkan oleh Engvall dan Perlmann pada tahun 1971. Teknik ini menggunakan jenis fasa pepejal enzim immunoassay untuk mengesan kehadiran protein tertentu dalam sampel cecair menggunakan antibodi yang diarahkan terhadap protein khusus ini. Ujian ini adalah alat diagnostik yang biasa digunakan dalam bidang perubatan, patologi tumbuhan dan bioteknologi.

Mekanisme ujian ELISA

Dalam kebanyakan ujian ELISA, jumlah antigen yang tidak diketahui tidak bergerak ke sokongan padat (plat microlitre) pada mulanya. Kemudian antibodi utama yang sepadan digunakan di atas permukaan sokongan pepejal. Antibodi ini membentuk kompleks dengan antigen (kompleks antigen-antibodi). Antibodi utama terikat antigen dapat dikesan oleh antibodi sekunder yang dikaitkan dengan enzim melalui biokonjugasi. Dalam langkah terakhir ujian ELISA, bahan yang mengandungi substrat enzim ditambah. Sekiranya terdapat pengikatan antibodi utama yang betul kepada antigen, perubahan warna yang dapat dikesan dihasilkan oleh substrat. Akhirnya, ini mengukur antigen dalam sampel.

Rajah 01: pelbagai jenis ELISA

Selain itu, terdapat pendekatan yang berbeza untuk ELISA, seperti ELISA langsung dan ELISA tidak langsung. Pada masa ini, pelbagai ujian ELISA digunakan untuk mengesan patogen manusia seperti Mycobacterium tuberculosis, rotavirus, virus hepatitis B, virus hepatitis C, enterotoxin menghasilkan E.coli, HIV, dan SARS-CoV-2.

Apakah ujian ELISPOT?

ELISPOT adalah ujian imunosorben yang berkaitan dengan enzim yang mengesan sel-sel sitokin individu. Cecil Czerkinsky pertama kali menggambarkan ELISPOT pada tahun 1983. Ia adalah sejenis assay yang memberi tumpuan kepada kuantitatif mengukur kekerapan rembesan sitokin untuk satu sel. Ia juga diklasifikasikan sebagai teknik yang menggunakan antibodi untuk mengesan analit protein biologi atau kimia. Ujian Fluorospot adalah variasi ujian ELISPOT, yang menggunakan pendarfluor untuk menganalisis pelbagai analisis (lebih banyak protein rahsia).

Mekanisme ujian ELISPOT

Dalam mekanisme ini, antibodi monoklonal spesifik sitokin ditambah ke telaga plat microlitre pada mulanya. Kemudian sel -sel yang dikehendaki diperhatikan ditambah ke telaga. Kemudian, sel -sel diinkubasi. Semasa inkubasi sel, sel -sel dibenarkan bertindak balas terhadap sebarang rangsangan dan merembeskan sitokin. Sitokin yang telah dirembeskan oleh sel -sel yang diinkubasi akan melekat pada antibodi kerana sel -sel dikelilingi oleh antibodi monoklonal spesifik sitokin.

Rajah 02: Ujian ELISPOT

Untuk mengesan antibodi monoklonal spesifik sitokin ini, antibodi pengesanan spesifik biotinilasi ditambah ke telaga. Antibodi pengesanan spesifik biotinilasi menangkap antibodi monoklonal spesifik sitokin di telaga. Selain itu, konjugasi streptavidin-enzim ditambah ke telaga untuk mengikat dengan antibodi pengesanan. Dalam langkah terakhir, substrat tertentu ditambah ke telaga. Reaksi enzim konjugasi dan substrat menghasilkan bintik -bintik yang berbeza di telaga. Tempat yang berbeza ini dibaca pada pembaca ELISPOT automatik. Pada akhirnya, ini akan mengira kekerapan rembesan sitokin.

Apakah persamaan antara Elisa dan Elispot?

• Mereka berdua adalah ujian imunosorben yang berkaitan dengan enzim.
• Kedua -dua ujian mengesan analisis protein tertentu.
• Ujian ini menggunakan antibodi tertentu untuk mengenal pasti analisis protein.
• Kedua -dua ujian menggunakan enzim dan substrat.
• Mereka digunakan sebagai alat diagnostik di makmal perubatan.

Apakah perbezaan antara Elisa dan Elispot?

ELISA adalah ujian imunosorben yang berkaitan dengan enzim yang menentukan jumlah kepekatan protein yang dirembeskan. Sebaliknya, ELISPOT adalah ujian imunosorben yang berkaitan dengan enzim yang mengukur sel-sel penyembuhan sitokin individu. Jadi, ini adalah perbezaan utama antara Elisa dan Elispot. Selain itu, dalam ujian ELISA, antigen pertama kali tidak bergerak ke telaga microlitre. Sebaliknya, dalam ujian ELISPOT, antibodi pertama kali tidak bergerak ke telaga microlitre. Oleh itu, ini adalah satu lagi perbezaan antara Elisa dan Elispot.

Infographic di bawah membentangkan analisis terperinci tentang perbezaan antara ELISA dan ELISPOT dalam bentuk jadual.

Ringkasan -Elisa vs Elispot

ELISA dan ELISPOT adalah dua ujian imunosorben yang berkaitan dengan enzim yang digunakan secara meluas dalam perubatan, patologi tumbuhan, bioteknologi, dan industri farmaseutikal yang berbeza. ELISA mengesan kehadiran ligan (protein) dalam sampel cecair menggunakan antibodi yang diarahkan terhadap ligan untuk diukur. Ujian ELISPOT adalah kaedah yang digunakan secara meluas untuk memantau tindak balas imun. Ia mengesan sel -sel penyembuhan sitokin individu menggunakan antibodi. Ini adalah teknik immunoassay dan bioassay. Oleh itu, ini adalah ringkasan perbezaan antara ELISA dan ELISPOT.

Rujukan:

1. Horlock, Claire. "Ujian imunosorben yang berkaitan dengan enzim (ELISA)."Persatuan British untuk Imunologi.
2. "Elispot."Topik Sciencedirect.

Ihsan gambar:

1. "Jenis Elisa" oleh Allan.Richard5093 - Kerja Sendiri (CC BY -SA 4.0) melalui Commons Wikimedia
2. "Elispot -en" oleh DadofbeanandBug - Fail ini berasal dari: Elispot.PNG (CC BY-SA 3.0) melalui Commons Wikimedia