Transformasi vs transfection
Transformasi dan pemindahan adalah dua teknik mudah yang digunakan untuk memperkenalkan gen asing ke dalam sel tuan rumah. Walau bagaimanapun, teknik ini bergantung pada jenis sistem tuan rumah atau vektor.
Apakah transformasi sel?
Transformasi adalah teknik yang digunakan untuk memperkenalkan gen ke dalam ragi dan sel bakteria. Teknik ini biasanya menyebabkan perubahan gen dalam gen, dan oleh itu ekspresi gen adalah kekal. Transformasi bakteria pertama kali diperkenalkan pada tahun 1928 oleh Frederick Griffith. Kemudian pada awal 1970 -an, teknik ini digunakan dalam E. coli. Semasa proses transformasi E. coli, sel-sel direndam dalam larutan ais CaCl2. Langkah ini membuat E.coli sel yang kompeten. Selepas itu, sel-sel yang kompeten bercampur dengan DNA plasmid dan diinkubasi di atas ais selama 20-30 minit. Kemudian kejutan haba yang singkat diberikan untuk membolehkan pemindahan DNA ke dalam sel. Akhirnya, sel-sel diletakkan dalam sup nutrien dan diinkubasi pada suhu 37 ° C selama 60-90 minit untuk menubuhkan plasmid. Sebaik sahaja langkah -langkah ini berjaya diselesaikan, sel -sel yang diubah boleh diletakkan di media yang sesuai untuk penyebaran sel. Oleh kerana, transformasi dianggap sebagai teknik yang tidak cekap, ia tidak boleh digunakan untuk penyediaan bank klon.
Apakah pemindahan sel?
Transfeksi adalah kaedah pengenalan gen asing, biasanya, ke dalam sel mamalia. Terdapat dua kaedah pemindahan; iaitu transfection sementara dan transfection yang stabil. Dalam transfection sementara, ekspresi gen tersedia untuk masa yang terhad; Oleh itu, perubahan gen menyebabkan ungkapan sementara. Kaedah transfeksi ini mudah dan pantas; oleh itu ia boleh digunakan secara rutin. Satu kelemahan transfeksi sementara adalah kesukaran memohon sistem sintesis protein berskala besar.
Semasa pemindahan yang stabil, gen sasaran disatukan ke dalam genom sel tuan rumah, dan oleh itu ekspresi gen kekal, tidak seperti transfection sementara.
Apakah perbezaan antara transformasi dan pemindahan?
• Transformasi adalah pengenalan gen ke dalam sel prokariotik (bakteria dan yis), sedangkan transfection biasanya dipanggil pengenalan gen ke dalam sel mamalia.
• Transformasi mengakibatkan pengubahan ternama, dalam gen, sedangkan transfection dapat mengakibatkan ekspresi sementara atau perubahan tetap dalam gen.