Perbezaan antara immunofluorescence dan imunohistokimia

Perbezaan utama - immunofluorescence vs immunohistochemistry
 

Diagnostik penyakit, yang menggunakan kaedah biologi molekul, telah menjadi kawasan baru muncul teknologi makmal klinikal. Ia merangkumi semua ujian dan kaedah untuk mengenal pasti penyakit dan memahami punca penyakit dengan menganalisis DNA, RNA atau protein yang dinyatakan dalam organisma. Kemajuan pesat dalam diagnostik molekul telah membolehkan penyelidikan asas mengenai penyakit berjangkit dan tidak berjangkit. Ini digunakan untuk menentukan perubahan tahap urutan atau ekspresi dalam gen penting atau protein yang terlibat dalam penyakit. Immunofluorescence (IF) dan Immunohistochemistry (IHC) adalah dua teknik yang digunakan secara meluas dalam biologi kanser. Jika adalah jenis IHC di mana kaedah pengesanan pendarfluor digunakan untuk menganalisis antibodi monoklonal dan poliklonal, sedangkan IHC menggunakan kaedah berasaskan kimia untuk mengesan antibodi monoklonal dan poliklonal. Ini adalah perbezaan utama antara jika dan ihc.

Kandungan

1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apa itu immunofluorescence 
3. Apa itu imunohistokimia
4. Persamaan antara immunofluorescence dan imunohistokimia
5. Perbandingan sampingan - immunofluorescence vs immunohistochemistry dalam bentuk jadual
6. Ringkasan

Apa itu immunofluorescence (jika)?

Immunofluorescence adalah teknik pengesanan di mana antibodi yang digunakan dalam ujian dilabel menggunakan pewarna neon atau protein pendarfluor untuk tujuan pengesanan. Berlabel antibodi sekunder boleh mengakibatkan isyarat latar belakang yang tidak diingini; Oleh itu, jika teknik didasarkan pada pelabelan antibodi utama pada masa ini untuk mengelakkan isyarat yang tidak diingini semasa pengesanan. Melalui teknik ini, pengikatan tidak spesifik antara antibodi utama dan sekunder dicegah, dan ia lebih cepat kerana tidak ada langkah inkubasi sekunder yang terlibat. Kualiti data juga bertambah baik.

Rajah 01: Pewarnaan immunofluorescence berganda untuk Brdu, Neun, dan GFAP

Fluorochromes atau pewarna pendarfluor adalah sebatian yang dapat menyerap radiasi, sebaiknya radiasi ultra violet yang teruja. Apabila zarah mencapai keadaan tanah dari keadaan teruja, mereka memancarkan radiasi yang ditangkap dan dikesan oleh pengesan untuk membentuk spektrum. Sangat penting bahawa label pendarfluor bersesuaian dan stabil untuk tindak balas tertentu dan ia harus dikonfirmasi dengan betul kepada antibodi untuk mendapatkan hasil yang tepat. Salah satu fluorochromes yang paling banyak digunakan ialah fluorescein isothiocyanate (FITC), yang berwarna hijau, dengan penyerapan dan panjang gelombang puncak gelombang 490 nm dan 520 nm, masing -masing. Rhodamine, ejen lain yang digunakan dalam, berwarna merah dan mempunyai panjang gelombang penyerapan dan pelepasan yang berbeza 553 nm dan 627 nm.

Apa itu imunohistokimia (IHC)?

IHC adalah kaedah ujian molekul yang diamalkan untuk mengenal pasti dan mengesahkan kehadiran antigen dalam sel sasaran. Sel sasaran boleh menjadi zarah berjangkit, patogen mikroba atau sel tumor malignan. IHC menggunakan antibodi monoklonal dan poliklonal untuk menentukan kehadiran antigen yang terdapat pada permukaan sel sel sasaran. Teknik ini berdasarkan pengikatan antigen-antibodi. Penanda pengesanan konjugasi kepada antibodi ini untuk mengesan kehadiran atau ketiadaan antigen tertentu. Penanda ini boleh menjadi penanda kimia seperti enzim, antibodi fluorescently yang ditandakan atau antibodi berlabel radio.

Rajah 02: Slice otak tetikus yang diwarnai oleh imunohistokimia

Aplikasi IHC yang paling popular adalah dalam biologi sel kanser untuk mengenal pasti kehadiran tumor malignan, tetapi ia juga digunakan untuk mengesan penyakit berjangkit.

Apakah persamaan antara immunofluorescence dan imunohistokimia?

• Immunofluorescence dan imunohistokimia berlaku di bawah keadaan in vitro.
• Kedua-dua teknik ini berdasarkan antibodi antigen
• Kedua -duanya adalah teknik yang sangat pesat.
• Keputusan teknik boleh dihasilkan semula.
• Kedua -duanya telah meningkatkan kualiti data.
• Teknik -teknik ini digunakan dalam diagnostik untuk kanser dan penyakit berjangkit.

Apakah perbezaan antara immunofluorescence dan imunohistokimia?

Ringkasan -Immunofluorescence vs immunohistochemistry

Mekanisme molekul telah membawa banyak perubahan dalam bidang perubatan, yang menimbulkan kaedah ujian molekul maju yang telah membawa revolusi dalam bidang diagnostik. Ciptaan ini telah membawa kepada pengenalan dan pengesahan penyakit yang cepat dan tepat, dengan itu membolehkan pentadbiran dan pengeluaran ubat yang berjaya. Teknik ini juga digunakan dalam farmakologi untuk mencari sasaran ubat dan untuk mengesahkan sifat farmakokinetik ubat semasa metabolisme dadah.  Jika dan IHC adalah dua kaedah diagnostik yang berdasarkan konsep antigen dan antibodi mengikat, walaupun mod pengesanan dalam kedua -dua teknik berbeza. Sekiranya menggunakan prinsip pendarfluor untuk mengesan antigen dan IHC menggunakan konsep konjugasi kimia untuk mengesan antigen. Ini adalah perbezaan antara jika dan ihc.

Muat turun PDF versi immunofluorescence vs immunohistochemistry

Anda boleh memuat turun versi PDF artikel ini dan menggunakannya untuk tujuan luar talian mengikut nota petikan. Sila muat turun versi pdf di sini perbezaan antara immunofluorescence dan immunohistochemistry.

Rujukan:

1. Aoki, Valéria, et al. "Immunofluorescence langsung dan tidak langsung."Anais Brasileiros de Dermatologia, Sociedadebrasileira de Dermatologia, boleh didapati di sini. Diakses 25 Ogos. 2017.
2. Duraiyan, Jeyapradha, et al. "Aplikasi imunohistokimia."Jurnal Farmasi & Bioallied Sciences, Medknow Publications & Media Pvt Ltd, Ogos. 2012, boleh didapati di sini. Diakses 25 Ogos. 2017.

Ihsan gambar:

1. "Double immunofluorescence pewarnaan untuk Brdu, Neun dan Gfap" oleh Ma M, Ma Y, Yi X, Guo R, Zhu W, Fan X, Xu G, Frey Wh 2, Liu X. - Penghantaran intranasal mengubah faktor pertumbuhan-beta1 pada tikus selepas strok mengurangkan jumlah infark dan meningkatkan neurogenesis dalam zon subventrikular; PMID 19077183 (CC oleh 2.0) melalui Commons Wikimedia
2. "Hipotalamus tisu tetikus yang diwarnai oleh ABC-Immunohistochemistry" oleh Zabbn-Kerja Sendiri (CC BY-SA 3.0) melalui Commons Wikimedia