Perbezaan antara elektroforesis gel mendatar dan menegak

Perbezaan utama - Elektroforesis gel menegak mendatar
 

Elektroforesis gel adalah teknik makmal yang digunakan dalam genetik untuk memisahkan campuran yang mengandungi DNA, RNA, dan protein lain mengikut saiz masing -masing dan saiz molekul masing -masing. DNA, RNA atau protein yang perlu dipisahkan dalam kaedah ini dijalankan melalui gel yang mengandungi liang kecil. Molekul didorong melalui gel oleh medan elektrik. Molekul melewati liang -liang gel, dan kelajuan pergerakan berkadar songsang dengan panjang masing -masing. Oleh itu, molekul dengan saiz molekul yang lebih rendah akan bergerak lebih cepat daripada molekul dengan berat molekul yang lebih tinggi. Medan elektrik dihasilkan oleh perbezaan yang bertanggungjawab di dua hujung gel. Satu hujung mengandungi caj positif, dan hujung yang lain mengandungi caj negatif. Oleh kerana molekul DNA dan RNA dikenakan secara negatif, mereka akan tertarik ke arah gel yang positif dari gel. Elektroforesis gel boleh menjadi dua kaedah yang berbeza: elektroforesis gel mendatar dan elektroforesis gel menegak. Dalam elektroforesis gel mendatar, gel hadir dalam orientasi mendatar dan tenggelam dalam penampan berjalan berterusan yang terdapat di dalam kotak gel itu sendiri. Dalam elektroforesis gel menegak, sistem penampan berorientasikan secara menegak dan tidak berterusan dengan dua bilik yang terdapat di bahagian atas dan bahagian bawah dengan katod dan anod, masing -masing. Ini adalah perbezaan utama antara elektroforesis gel mendatar dan menegak.

Kandungan

1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apakah elektroforesis gel mendatar
3. Apakah elektroforesis gel menegak
4. Persamaan antara elektroforesis gel mendatar dan menegak
5. Perbandingan sampingan - Elektroforesis gel menegak mendatar dalam bentuk jadual
6. Ringkasan

Apakah elektroforesis gel mendatar?

Elektroforesis gel mendatar menggunakan teori asas untuk pemisahan molekul DNA, RNA atau protein mengikut saiz molekul masing -masing dan caj. Dalam teknik ini, gel hadir dalam orientasi mendatar dan tenggelam dalam penampan yang berterusan. Gel Agarose digunakan untuk memisahkan kotak gel menjadi dua petak. Satu hujung kotak gel mengandungi anod sementara hujung yang lain mengandungi katod. Apabila arus digunakan, penampan yang digunakan dalam teknik ini membolehkan penciptaan kecerunan caj. Apabila caj itu digunakan, gel cenderung memanaskan. Penampan juga berfungsi sebagai penyejuk, yang mengekalkan suhu pada tahap optimum. Recirculation buffer berjalan menghalang pembentukan kecerunan pH. Sistem penampan yang tidak berterusan tidak boleh digunakan dalam elektroforesis gel mendatar kerana kedua -dua petak sistem gel dihubungkan dengan penampan berjalan. Acrylamide digunakan semasa elektroforesis gel untuk memisahkan campuran protein.

Rajah 01: Elektroforesis gel mendatar

Dalam elektroforesis gel mendatar, acrylamide tidak boleh digunakan kerana kotak gel terdedah kepada oksigen. Oleh kerana kehadiran oksigen, pempolimeran acrylamide dihalang, dan ini mengganggu pembentukan gel. Elektroforesis gel mendatar adalah kaedah tanpa usaha yang digunakan dalam pemisahan DNA dan RNA.

Apakah elektroforesis gel menegak?

Teknik elektroforesis gel menegak berfungsi mengikut teori utama elektroforesis gel, tetapi dianggap lebih kompleks daripada kaedah elektroforesis gel mendatar. Teknik ini menggunakan penampan yang tidak berterusan. Katod terletak di ruang atas, dan anod terletak di ruang bawah. Elektrod yang terdapat di setiap petak menyediakan medan elektrik yang diperlukan. Lapisan gel nipis dicurahkan di antara dua plat kaca yang dipasang. Oleh itu, bahagian atas gel ditenggelamkan di ruang atas, dan bahagian bawah gel terendam di ruang di bahagian bawah. Sebaik sahaja arus digunakan, sebahagian kecil penampan bergerak ke ruang bawah dari ruang atas melalui gel. Semasa yang digunakan dalam teknik ini adalah unit minit.

Rajah 02: Elektroforesis gel menegak

Dalam elektroforesis gel menegak, penampan hanya mengalir melalui gel. Ini membolehkan kawalan tepat kecerunan voltan semasa peringkat pemisahan. Gel acrylamide boleh digunakan kerana petak tidak terdedah kepada oksigen atmosfera. Oleh kerana saiz liang acrylamide yang lebih kecil, pemisahan yang tepat dapat dicapai dengan resolusi yang lebih tinggi.

Apakah persamaan antara elektroforesis gel mendatar dan menegak?

• Kedua -dua sistem berfungsi mengikut teori asas elektroforesis gel.
• Anod dan katod digunakan untuk menyediakan medan elektrik yang diperlukan dalam kedua -dua sistem.

Apakah perbezaan antara elektroforesis gel mendatar dan menegak?

Ringkasan -Elektroforesis gel menegak mendatar

Elektroforesis gel adalah teknik makmal yang digunakan secara meluas dalam pemisahan campuran yang mengandungi molekul DNA, RNA, dan protein. Terdapat dua kaedah elektroforesis gel: elektroforesis gel mendatar dan menegak. Dalam elektroforesis gel mendatar, penampan berjalan berterusan sementara dalam elektroforesis gel menegak, ia tidak berterusan. Ini adalah perbezaan antara elektroforesis gel mendatar dan menegak. Kedua -dua sistem berfungsi mengikut prinsip umum elektroforesis gel.

Muat turun versi PDF elektroforesis gel menegak mendatar

Anda boleh memuat turun versi PDF artikel ini dan menggunakannya untuk tujuan luar talian mengikut nota petikan. Sila muat turun versi PDF di sini perbezaan antara elektroforesis gel mendatar dan menegak.

Rujukan:

1.Warren, Chad m., et al. "Elektroforesis gel vertikal dan elektroblotting protein berat molekul tinggi."Elektroforesis, Vol. 24, no. 11, 2003, pp. 1695-1702., doi: 10.1002/ELPS.200305392.
2."Sistem gel mendatar dan menegak - sistem gel mendatar."Diagnostik Kebangsaan, boleh didapati di sini. Diakses pada 28 Ogos. 2017.

Ihsan gambar:

1. "Alat Elektroforesis Gel" oleh Jeffrey M. Vinocur - Kerja Sendiri (CC oleh 2.5) Melalui Wikimedia Commons
2. "Elektroforesis Gel Polyacrylamide Protein" oleh Jean-Etienne Minh-Duy Poirrier dari Bruxelles, Belgium-Protein dalam elektroforesis gel 1D (CC by-SA 2.0) melalui Commons Wikimedia