Perbezaan antara GFP dan EGFP

The Perbezaan utama antara GFP dan EGFP ialah GFP adalah Protein jenis liar yang dimasukkan ke dalam pengklonan molekul sel bukan mamalia manakala EGFP adalah jenis GFP yang lebih baik atau direkayasa yang boleh digunakan pada sel-sel mamalia.

Pengklonan molekul adalah teknik lanjutan yang digunakan oleh saintis dalam menyatakan protein melalui teknologi rekombinan. Dalam teknologi DNA rekombinan, perlu mengubah vektor rekombinan berjaya untuk menjadi tuan rumah organisma.  Oleh itu, semasa proses transformasi, ia harus dikenal pasti dan mengesahkan sama ada gen kepentingan telah berubah atau tidak kepada tuan rumah. Untuk menilai ini, ahli biologi molekul mengamalkan beberapa teknik. Daripada teknik tersebut, satu adalah gen wartawan. Gen wartawan ini bertindak sebagai penanda yang boleh dipilih untuk memilih transformasi yang betul. Oleh itu, protein pendarfluor hijau (GFP) dan protein pendarfluor hijau yang dipertingkatkan (EGFP) adalah dua protein wartawan yang digunakan dalam pengklonan molekul.

Kandungan

1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apa itu GFP
3. Apa itu EGFP
4. Persamaan antara GFP dan EGFP
5. Perbandingan sampingan - GFP vs EGFP dalam bentuk jadual
6. Ringkasan

Apa itu GFP?

GFP adalah protein jenis liar yang mengandungi 238 residu asid amino dan beberapa kawasan yang boleh dipilih dari urutan asid amino yang membezakannya dari protein pendarfluor yang lain. Tambahan pula, protein jenis liar ini pada asalnya berasingan dari Aequorea Victoria; jenis ubur -ubur. Walau bagaimanapun, dalam fenomena semulajadi, ubur -ubur dapat menghasilkan pendarfluor warna hijau sebagai tindak balas kepada rangsangan tertentu.

Terdahulu, konsep ini mengejutkan para saintis, dan mereka memutuskan untuk menggunakannya pada teknologi DNA rekombinan mereka. Oleh itu, saintis menggunakan bentuk mutan gen jenis liar ini sebagai gen wartawan dalam kajian ekspresi gen mereka. Gen jenis liar GFP mampu menghasilkan protein yang memberikan pendarfluor pada suhu bilik atau di bawah cahaya UV. Oleh itu, apabila dimasukkan ke dalam transforman, ia menyatakan dan menghasilkan pendarfluor. Sekiranya keputusan pendarfluor selepas proses transformasi, ia mengesahkan kejayaan proses transformasi. Dengan kata -kata mudah, pelepasan pendarfluor menandakan transformasi vektor yang berjaya yang membawa gen yang menarik ke dalam tuan rumah.

Rajah 01: GFP

Kerana sebab ini, GFP bertindak sebagai dalam vivo penanda ekspresi gen. Pada masa ini, teknik kejuruteraan genetik digunakan untuk menghasilkan GFP. Juga, banyak versi GFP yang lebih baik seperti EGFP tersedia. Oleh itu, ini membolehkan penggunaan GFP yang cekap dalam pengklonan molekul dan kajian ekspresi gen.

Apa itu EGFP?

Protein pendarfluor hijau yang dipertingkatkan atau EGFP adalah versi GFP yang lebih baik. Dengan kata-kata mudah, kita dapat menentukan EGFP sebagai versi kejuruteraan GFP jenis liar. Apabila gen jenis liar GFP bermutasi, ia menghasilkan kesan yang bermanfaat. Oleh itu, gen GFP yang bermutasi membolehkan ekspresi watak -watak baru, dan sebagai hasilnya, kita dapat menghasilkan GFP yang dipertingkatkan dengan ciri -ciri yang lebih baik. Selain itu, kita dapat memperkenalkan mutasi dengan jayanya ke gen GFP jenis liar menggunakan penyinaran atau kaedah kimia. Gen yang bermutasi ini kemudian menghasilkan EGFP, yang mempunyai ciri -ciri yang lebih bermanfaat.

Rajah 02: EGFP

Ciri -ciri EGFP yang lebih baik adalah seperti berikut;

• Dapat memancarkan isyarat pendarfluor yang lebih kuat.
• Mempunyai kepekaan yang tinggi.
• Boleh menggunakannya pada sel mamalia dan bukannya prokariot dan eukariot tahap rendah yang lain.
• Juga, memberikan peningkatan kesucian produk.

Oleh itu, berbanding dengan GFP, EGFP adalah pilihan pilihan untuk kajian ekspresi gen. Walau bagaimanapun, produk lebih mahal berbanding dengan GFP.

Apakah persamaan antara GFP dan EGFP?

• GFP dan EGFP adalah dua protein yang mempunyai keupayaan untuk memancarkan warna hijau
• Oleh itu, kedua -duanya berfungsi sebagai protein wartawan dalam kajian ekspresi gen.
• Juga, adalah mungkin untuk mensintesis kedua -duanya menggunakan teknologi DNA rekombinan.
• Lebih -lebih lagi, mudah untuk terus bermutasi kedua -dua jenis ini untuk mensintesis bentuk yang lebih baik.

Apakah perbezaan antara GFP dan EGFP?

Gen Reporter adalah gen yang melekat dengan gen yang menarik dalam teknologi DNA rekombinan. Ia menandakan kejayaan transformasi vektor rekombinan kepada tuan rumah. Di sini, GFP dan EGFP adalah dua jenis protein pemborosan hijau yang berfungsi sebagai protein wartawan. Walau bagaimanapun, perbezaan utama antara GFP dan EGFP adalah bahawa GFP adalah jenis liar manakala EGFP adalah versi kejuruteraan GFP. Tambahan pula, EGFP mempunyai ciri -ciri yang lebih bermanfaat daripada GFP. Sebagai contoh, EGFP menghasilkan cahaya pendarfluor yang lebih kuat dan lebih sensitif daripada GFP. Perbezaan lain antara GFP dan EGFP adalah sistem di mana kita boleh menggunakannya. Sistem bukan mamalia menggunakan GFP manakala sistem mamalia menggunakan EGFP.

Infographic di bawah membentangkan perbezaan antara GFP dan EGFP dalam bentuk jadual.

Ringkasan -GFP vs EGFP

GFP dan EGFP adalah protein wartawan dalam kajian pengklonan molekul dan gen. GFP adalah protein jenis liar, yang merupakan protein pendarfluor hijau. Protein pada mulanya secara berasingan dari ubur -ubur Aequorea Victoria. Sebaliknya, EFGP adalah bentuk protein GFP yang dipertingkatkan. Ia adalah mutan jenis liar dengan ciri-ciri yang lebih baik. Oleh itu, EFGP mempunyai kekuatan isyarat yang lebih tinggi dan kepekaan yang lebih tinggi. Oleh itu, kita boleh menggunakannya pada vektor mamalia. Sebaliknya, penggunaan GFP hanya pada vektor bukan mamalia. Dalam semua, ini adalah perbezaan antara GFP dan EGFP.

Rujukan:

1.Cinelli, R A, et al. "Protein pendarfluor hijau yang dipertingkatkan sebagai alat untuk analisis dinamik dan penyetempatan protein: kajian pendarfluor tempatan di peringkat molekul tunggal."Fotokimia dan fotobiologi., U.S. Perpustakaan Perubatan Negara, Jun 2000. Terdapat di sini  
2."PDB101: Molekul Bulan: Protein Pendarfluor Hijau (GFP)."RCSB: PDB-101. Terdapat di sini

Ihsan gambar:

1."Filem Protein Pendarfluor GFP" oleh Erin Rod - Kerja Sendiri, (CC BY -SA 4.0) melalui Commons Wikimedia 
2."Ca2 Amigo2 EGFP Mouse" oleh Dudek, Serena; Curuana, Douglas; Carstens, Kelly - Kerja Sendiri, (CC BY -SA 3.0) melalui Commons Wikimedia