Apakah perbezaan antara penapisan gel dan kromatografi afiniti

The Perbezaan utama antara penapisan gel dan kromatografi afiniti adalah kromatografi penapisan gel bergantung kepada perbezaan berat molekul atau saiz sampel analit, sedangkan kromatografi afiniti bergantung kepada pertalian analit ke ligan yang tidak bergerak.

Istilah kromatografi dalam kimia analisis merujuk kepada proses pemisahan komponen dalam campuran menggunakan teknik yang berbeza. Kromatografi adalah nama kolektif yang mewakili pelbagai bilangan kaedah yang berbeza untuk pemisahan.

Kandungan

1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apakah kromatografi penapisan gel 
3. Apakah kromatografi afiniti 
4. Penapisan gel vs kromatografi afiniti dalam bentuk jadual
5. Ringkasan -Penapisan Gel vs Kromatografi Affinity 

Apakah kromatografi penapisan gel?

Kromatografi penapisan gel adalah teknik analisis di mana pemisahan komponen bergantung kepada perbezaan berat atau saiz molekul. Teknik ini juga dikenali sebagai kromatografi pengecualian saiz atau kromatografi sabit molekul. Teknik pemisahan dalam proses ini bergantung kepada keupayaan molekul yang berlainan dalam sampel untuk memasuki liang-liang medium pengapungan gel.

Dalam teknik penapisan gel, fasa pegun mengandungi manik bahan terhidrat, seperti span yang mempunyai liang dimensi molekul yang mengandungi pelbagai saiz sempit. Sekiranya kita lulus larutan berair yang terdiri daripada molekul pelbagai saiz melalui lajur yang mengandungi "saringan molekul" ini, molekul yang lebih besar daripada liang -liang penapisan medium bergerak dengan cepat melalui lajur. Sebaliknya, molekul yang lebih kecil memasuki liang gel dan cenderung bergerak perlahan melalui lajur. Molekul elute dari lajur mengikut saiz molekul penurunan. Di sini, had pengecualian gel adalah jisim molekul molekul terkecil yang tidak dapat menembusi liang -liang gel tertentu.

Terdapat pelbagai jenis teknik penapisan gel, seperti kaedah penapisan gel tidak langsung, penapisan gel mantap, dialisis manik gel, dan lain-lain. Kromatografi penapisan gel tidak langsung berguna dalam penentuan hormon tiroid percuma. Kromatografi penapisan gel mantap adalah teknik tidak langsung yang berguna kebanyakannya untuk pengukuran steroid percuma seperti kortisol, testosteron, dan lain-lain. Dialisis manik gel, sebaliknya, adalah pengubahsuaian penapisan gel mantap yang lebih mudah.

Apakah kromatografi afiniti?

Kromatografi Affinity adalah teknik analisis dan kaedah pemisahan yang bergantung kepada interaksi mengikat tertentu antara ligan yang tidak bergerak dan rakan mengikatnya. Beberapa contoh termasuk mengikat antibodi-antigen, mengikat enzim-substrat, dan enzim-inhibitor mengikat. Oleh itu, teknik ini mempunyai banyak aplikasi penting dalam penyucian asid nukleik, pemurnian protein dari ekstrak sel, dan pemurnian dari darah.

Dalam teknik ini, harta yang paling penting adalah ligan imobilisasi. Kita boleh menggunakan pelbagai bahan seperti acrylates dan gel silika untuk ini. Penting untuk mengelakkan gangguan sterik molekul sasaran ke ligan. Selain itu, perencat dilampirkan pada fasa pepejal. Kami memanggil perencat ini sebagai spacer. Secara klasik, spacer terdiri daripada rantai hidrokarbon.

Fasa pegun kromatografi afiniti mengandungi teras, spacer, dan ligan. Kadang -kadang, ia juga mempunyai ion logam yang ditambah pula dengan ligan. Fasa pepejal yang paling disukai untuk fasa pegun dalam teknik ini adalah gel agarose kerana ia mudah dibebaskan untuk mengisi dan mengemas lajur dengan katil resin dari saiz apa pun, dan ia cukup besar untuk biomolekul mengalir dengan bebas ke dalam dan melalui manik -manik. Ligan boleh kovalen melekat pada polimer manik dengan pelbagai cara. Sebatian spacer yang paling biasa ialah sianogen bromida, epoksida, epoksida dengan asid C6, dan diamin. Sebaliknya, ligan kita boleh menggunakan berbeza mengikut sasaran, e.g., antibodi-antigen, besi atau aluminium ion-phosphoprotein, avidin-biotin, glutathione-gst, protein chelator-his-tagged, dll.

Apakah perbezaan antara penapisan gel dan kromatografi afiniti?

Kromatografi adalah teknik analisis penting. Kromatografi penapisan gel dan kromatografi afiniti adalah dua variasi penting kromatografi. Perbezaan utama antara penapisan gel dan kromatografi afiniti ialah kromatografi penapisan gel bergantung kepada perbezaan berat molekul atau saiz sampel analit, sedangkan kromatografi afiniti bergantung kepada pertalian analit kepada ligan yang tidak bergerak.

Ringkasan -Penapisan Gel vs Kromatografi Affinity

Terdapat pelbagai jenis teknik kromatografi mengikut aplikasi mereka dan sifat sampel analit. Penapisan gel dan kromatografi afiniti adalah dua jenis teknik. Perbezaan utama antara penapisan gel dan kromatografi afiniti ialah kromatografi penapisan gel bergantung kepada perbezaan berat molekul atau saiz sampel analit, sedangkan kromatografi afiniti bergantung kepada pertalian analit kepada ligan yang tidak bergerak.

Rujukan:

1. "Penapisan Gel." Gambaran Keseluruhan | Topik Sciencedirect.
2. "Kromatografi Affinity: Prinsip." Cube Biotech.

Ihsan gambar:

1. "Kromatografi Penapisan Gel" oleh Matasnavickas - Kerja Sendiri (CC BY -SA 4.0) melalui Commons Wikimedia
2. "Lajur Kromatografi" (CC0) melalui SVG Percuma