Apakah perbezaan antara FPLC dan HPLC

The Perbezaan utama FPLC dan HPLC adalah bahawa FPLC adalah sejenis kromatografi cecair yang memurnikan biomolekul besar seperti protein, nukleotida dan peptida, manakala HPLC adalah sejenis kromatografi cecair yang memisahkan sebatian berat molekul kecil.

Kromatografi cecair adalah teknik yang digunakan untuk memisahkan sampel ke dalam komponennya. Pemisahan ini berlaku kerana interaksi sampel tertentu dengan fasa mudah alih dan pegun. Komponen dalam sampel dipisahkan berdasarkan pertalian setiap komponen untuk fasa mudah alih dalam kromatografi cecair. Oleh kerana fasa mudah alih dan sampel melalui lajur, komponen sampel mula memisahkan ke dalam band yang dapat dikesan oleh spektroskopi UV-Vis. Oleh itu, FPLC dan HPLC adalah dua jenis teknik kromatografi cecair.

Kandungan

1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apa itu FPLC 
3. Apa itu HPLC
4. Persamaan - FPLC dan HPLC
5. FPLC vs HPLC dalam bentuk jadual
6. Ringkasan - FPLC vs HPLC

Apa itu FPLC?

FPLC adalah sejenis kromatografi cecair yang memurnikan biomolekul besar seperti protein, nukleotida, dan peptida. The kromatografi cecair protein cepat (FPLC) pertama kali dibangunkan dan dipasarkan di Sweden oleh Farmacia Company pada tahun 1982. Ia sering digunakan untuk menganalisis atau membersihkan campuran protein. Ini berlaku berdasarkan prinsip sampel komponen sampel untuk bergerak cecair (fasa mudah alih) dan bahan pepejal berliang (fasa pegun). Di FPLC, fasa mudah alih adalah penampan, dan fasa pegun adalah resin yang terdiri daripada manik. Ia biasanya terdiri daripada agarose berkaitan silang yang dibungkus ke dalam kaca silinder atau lajur plastik.

Rajah 01: FLPC (kromatografi cecair protein cepat) alat

Dalam kebanyakan strategi FLPC, resin pertukaran ion digunakan. Oleh itu, protein minat akan mengikat resin dengan interaksi caj. Teknik FLPC juga menggunakan dua buffer: penampan 1 (penampan berjalan) dan penampan 2 (penampan elusi). Pada mulanya, apabila menjalankan penampan dan campuran sampel berjalan melalui lajur, protein minat dalam campuran akan mengikat ke resin dengan interaksi caj. Tetapi protein kepentingan menjadi dipisahkan dan kembali kepada penyelesaian dalam penampan elusi apabila penampan elusi berjalan melalui lajur pada akhir proses. Kemudian, penyelesaian (eluant yang mengandungi protein minat) melewati dua pengesan, yang mengukur kepekatan garam dan kepekatan protein. Oleh kerana setiap protein dielakkan, ia kelihatan sebagai "puncak" semasa pengesanan dan boleh dikumpulkan untuk kegunaan selanjutnya.

Apa itu HPLC?

HPLC adalah sejenis kromatografi cecair yang memisahkan sebatian berat molekul kecil. Pada tahun 1969, HPLC pertama dihasilkan secara komersil oleh Waters Corporation, Amerika Syarikat. Dalam kromatografi cecair berprestasi tinggi (HPLC), campuran sampel (analit) dalam pelarut (fasa mudah alih) dipam melalui lajur dengan bahan pembungkusan kromatografi (fasa pegun) pada tekanan tinggi. Campuran sampel dibawa oleh aliran gas pembawa bergerak helium atau nitrogen.

Rajah 02: HPLC (kromatografi cecair berprestasi tinggi)

Komponen dalam campuran sampel yang mempunyai sedikit interaksi dengan fasa pegun atau jumlah interaksi yang paling banyak dengan fasa mudah alih akan keluar dari lajur lebih cepat. Sebaliknya, komponen dalam campuran sampel yang mempunyai jumlah interaksi yang paling banyak dengan fasa pegun atau sedikit interaksi dengan fasa mudah alih akan keluar dari lajur lebih perlahan. Berdasarkan prinsip interaksi di atas, komponen campuran sampel dapat dipisahkan. Selain itu, pengesan instrumen mengenal pasti setiap komponen campuran sampel yang keluar dari lajur. HPLC digunakan untuk memeriksa sampel alam sekitar dan biologi untuk kehadiran atau ketiadaan sebatian yang diketahui, seperti ubat, toksin atau racun perosak. Ia digunakan dalam industri yang berbeza seperti farmaseutikal, alam sekitar, forensik, dan bahan kimia.

Apakah persamaan antara FPLC dan HPLC?

1. FPLC dan HPLC adalah jenis kromatografi cecair.
2. Kedua -duanya digunakan untuk memisahkan dan mengenal pasti sampel biologi.
3. Mereka mempunyai fasa mudah alih cecair dan fasa pegun yang kukuh.
4. Kedua -dua teknik menggunakan lajur untuk melalui sampel.
5. Teknik ini menggunakan pam, pengesan, injap dan perisian untuk pemisahan dan pengesanan sampel.

Apakah perbezaan antara FPLC dan HPLC?

FPLC adalah sejenis kromatografi cecair yang digunakan untuk membersihkan biomolekul besar seperti protein, nukleotida, dan peptida. HPLC adalah sejenis kromatografi cecair yang digunakan untuk memisahkan sebatian berat molekul kecil. Jadi, ini adalah perbezaan utama antara FPLC dan HPLC. Selain itu, FPLC menggunakan pH dan kekonduksian monitor sebagai baik sebagai pengumpul pecahan. Sebaliknya, HPLC tidak menggunakan pemantau pH dan kekonduksian dan pengumpul pecahan.

Infographic di bawah menyenaraikan lebih banyak perbezaan antara FPLC dan HPLC dalam bentuk jadual.

Ringkasan -FPLC vs HPLC

Kromatografi adalah teknik analisis makmal yang digunakan untuk pemisahan komponen dari campuran. Ia dibahagikan kepada beberapa jenis seperti kromatografi lajur, kromatografi gas, kromatografi cecair, kromatografi pertukaran ion, dll. FPLC dan HPLC adalah dua jenis teknik kromatografi cecair. FPLC adalah sejenis kromatografi cecair yang digunakan untuk membersihkan biomolekul besar seperti protein, nukleotida, dan peptida. Sebaliknya, HPLC adalah sejenis kromatografi cecair yang digunakan untuk memisahkan sebatian berat molekul kecil. Oleh itu, ini adalah ringkasan apa perbezaan antara FPLC dan HPLC.

Rujukan:

1. "Kromatografi cecair protein cepat."Berita-perubatan.bersih, 25 Jan. 2019.
2. "Apakah kromatografi cecair HPLC/berprestasi tinggi?"Lab-latihan, 11 Mei 2021.

Ihsan gambar:

1. "Alat Kromatografi" oleh GIAC83 - Kerja Sendiri (CC BY -SA 2.5) Melalui Wikimedia Commons
2. "HPLC" oleh Sam.F. - Kerja Sendiri (CC BY-SA 3.0) melalui Commons Wikimedia