Apakah perbezaan antara coomassie dan pewarnaan perak

The Perbezaan utama antara coomassie dan pewarnaan perak Adakah pewarnaan coomassie adalah teknik pewarnaan protein yang menggunakan noda biru coomassie yang cemerlang, sementara pewarnaan sekerat adalah teknik pewarnaan protein yang menggunakan noda perak.

Pemisahan dan pengenalan protein adalah langkah kritikal dalam analisis proteome. Mereka memerlukan pencirian protein resolusi tinggi selepas elektroforesis gel. Terdapat banyak teknik pewarnaan yang termasuk noda yang berbeza seperti pewarna anionik (Coomassie Brilliant Blue), kation logam (imidazole-zink), noda perak dan pewarna pendarfluor, dll. Kadang -kadang, probe radioaktif juga boleh digunakan. Pilihan teknik pewarnaan bergantung kepada kesederhanaan, ketersediaan peralatan pengimejan di makmal, dll.

Kandungan

1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apa itu Pewarnaan Coomassie
3. Apa pewarnaan perak
4. Persamaan -Pewarnaan Coomassie dan Perak
5. Coomassie vs perak pewarnaan dalam bentuk jadual
6. Ringkasan -Coomassie vs Silver Pewarnaan

Apa itu Pewarnaan Coomassie?

Pewarnaan Coomassie adalah teknik pewarnaan protein yang menggunakan noda biru coomassie yang cemerlang. Ia biasanya dipanggil Teknik Biru Coomassie. Coomassie Brilliant Blue adalah protein anionik yang paling popular. Noda ini biasanya mencemarkan hampir semua protein dengan linearity kuantitatif yang baik pada kepekaan sederhana. Coomassie Brilliant Blue Stain mengikat tidak khusus kepada hampir semua protein. Terdapat dua varian noda biru coomassie yang berbeza: R-250 dan G-250. R-2550 menawarkan masa pewarnaan yang lebih pendek, sementara G-250 boleh didapati dalam formulasi yang lebih sensitif dan mesra alam.

Rajah 01: Pewarnaan Coomassie

Pewarna Coomassie sangat popular dalam kajian spektrometri massa dan kajian pengenalan protein. Selain itu, Bio-Safe Coomassie Stain adalah formulasi tidak berbahaya Coomassie Blue G-250 yang kini terdapat di pasaran. Kelebihan formulasi ini hanya memerlukan air untuk membilas dan menghancurkan. Bio-Safe Coomassie Stain menawarkan kepekaan bersamaan dengan coomassie biru konvensional G-250 tetapi lebih baik daripada Coomassie Stain R-250. Tambahan pula, ia mempunyai protokol pewarnaan yang lebih mudah dan lebih cepat daripada Coomassie Blue G-250 konvensional. Kelemahan pewarnaan biru Coomassie adalah bahawa ia kurang sensitif berbanding dengan pewarnaan perak.  Pewarnaan Biru Coomassie lebih kurang 50 kali ganda kurang sensitif daripada pewarnaan perak. Walau bagaimanapun, kerana kesederhanaannya dalam mengikat, ia lebih disukai dalam banyak kajian.

Apa pewarnaan perak?

Pewarnaan Perak adalah teknik pewarnaan protein yang menggunakan noda perak. Pewarnaan perak digunakan untuk mengotorkan gel agarose dan polyacrylamide. Pewarnaan perak protein di gel agarose pertama kali dibangunkan pada tahun 1973 oleh Kerenyi dan Gallyas. Kemudian, ia disesuaikan untuk protein dalam gel polyacrylamide yang digunakan dalam SDS-PAGE. Pada masa ini, pewarnaan perak juga digunakan untuk pewarnaan DNA atau RNA. Untuk mengotorkan gel, gel diinkubasi dengan penyelesaian nitrat perak dalam kaedah ini. Pewarnaan perak noda laman web di mana protein hadir dari coklat hingga hitam.

Rajah 02: Pewarnaan Perak

Keamatan pewarnaan perak bergantung pada struktur utama protein. Selain itu, kebersihan kapal yang digunakan dan kesucian reagen juga boleh mempengaruhi kualiti pewarnaan perak. Walau bagaimanapun, kelemahan pewarnaan perak adalah bahawa ia tidak dapat mengesan semua protein, terutamanya glikoprotein dan protein dengan kumpulan yang diubah suai besar yang dilampirkan pada rantai sampingan mereka.

Apakah persamaan antara coomassie dan perak pewarnaan?

• Pewarnaan Coomassie dan Perak adalah dua teknik yang digunakan dalam pewarnaan protein.
• Mereka boleh mengotorkan kedua -dua protein dan DNA.
• Kedua -dua teknik pewarnaan mempunyai kelemahan.
• Teknik -teknik ini mempunyai langkah yang sama, seperti penetapan, pewarnaan dan pemusnahan.

Apakah perbezaan antara coomassie dan pewarnaan perak?

Pewarnaan Coomassie adalah teknik pewarnaan protein yang menggunakan noda biru coomassie, sementara pewarnaan sliver adalah teknik pewarnaan protein yang menggunakan noda perak. Oleh itu, ini adalah perbezaan utama antara coomassie dan perak pewarnaan. Tambahan pula, pewarnaan coomassie kurang sensitif daripada pewarnaan perak.

Infographic di bawah menyenaraikan perbezaan antara coomassie dan perak pewarnaan dalam bentuk tabular untuk perbandingan sampingan.

Ringkasan -Coomassie vs Silver Pewarnaan

Untuk memvisualisasikan protein, reaksi kimia yang mengikat pewarna atau warna protein yang boleh dilakukan. Ini dipanggil pewarnaan protein. Pewarnaan Coomassie dan Perak adalah dua teknik yang digunakan dalam pewarnaan protein. Teknik pewarnaan Coomassie menggunakan noda biru coomassie brilliant semasa pewarnaan sekerat menggunakan noda perak. Jadi, ini adalah perbezaan utama antara Coomassie dan Silver Pewarnaan.

Rujukan:

1. R, Brunelle JL, Hijau. "Coomassie Blue pewarnaan."Kaedah dalam enzimologi, u.S. Perpustakaan Perubatan Negara.
2. Chevallet, Mireille, et al. "Pewarnaan perak protein di gel polyacrylamide."Protokol Alam, Pub Alam. Kumpulan, 2006.

Ihsan gambar:

1. "SDS-PAGE Coomasie berwarna" oleh Piemmea-Kerja Sendiri (CC BY-SA 3.0) melalui Commons Wikimedia
2. "Page Agstain Microsat" oleh Parinoidmarvin - Kerja Sendiri (CC BY -SA 3.0) melalui Commons Wikimedia