Perbezaan antara trypsinization hangat dan sejuk

Perbezaan utama - hangat vs Sejuk Trypsinization
 

Trypsinization hangat dan sejuk adalah dua kaedah yang digunakan dalam penyisihan sel enzimatik dalam sel haiwan. The Perbezaan utama Antara trypsinization hangat dan sejuk, seperti yang dicadangkan oleh nama, bergantung pada suhu di mana trypsin ditambah untuk penyisihan selular. Trypsinization hangat berlaku di bawah keadaan suhu yang lebih tinggi (36.5 - 37 ⁰C) manakala trypsinization sejuk berlaku di bawah keadaan suhu rendah.

Semasa proses sel utama sel haiwan, terdapat tiga kaedah utama yang digunakan dan terbukti berjaya. Tiga kaedah ini termasuk penyisihan sel sel, penyisihan sel enzimatik dan teknik penjelasan utama. Pengasingan enzimatik sel-sel yang membawa kepada pengasingan sel dan ia dilakukan oleh enzim trypsin yang merendahkan protein. Oleh itu, proses ini dikenali sebagai trypsinization. Trypsinization boleh dilakukan di bawah dua keadaan yang berbeza iaitu trypsinization hangat dan trypsinization sejuk. Trypsinization hangat adalah kaedah merawat sel dengan trypsin di bawah keadaan hangat pada suhu 36.5 - 37 ⁰C. Trypsinization sejuk adalah proses rawatan trypsin yang berlaku di bawah keadaan yang lebih sejuk lebih baik dalam ais mengekalkan suhu yang sangat rendah.

Kandungan

1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apa itu trypsinization hangat
3. Apa itu trypsinization sejuk
4. Persamaan antara trypsinization hangat dan sejuk
5. Perbandingan sampingan - hangat vs trypsinization sejuk dalam bentuk jadual
6. Ringkasan

Apa itu trypsinization hangat?

Trypsinization boleh dilakukan untuk memisahkan komponen selular untuk mengasingkan sel -sel untuk menghasilkan budaya sel utama. Trypsin adalah enzim degradasi protein, dan campuran enzim yang digunakan dalam trypsinization boleh sama ada ekstrak kasar atau produk yang disucikan. Ekstrak kasar dikatakan lebih efisien dalam lisis protein dan perpecahan sel kerana ia mengandungi enzim degradasi lain.

Trypsinization hangat adalah kaedah enzimatik yang paling biasa digunakan untuk penyisihan sel yang berlaku di bawah keadaan suhu yang lebih tinggi. Sebelum rawatan dengan trypsinization, tisu yang dikehendaki dicincang ke dalam kepingan yang lebih kecil. Ia memudahkan proses penyisihan mudah. Tisu cincang kemudian dibasuh dalam media khas yang dikenali sebagai medium garam basal pembedahan.

Setelah selesai langkah mencuci, sel -sel berubah menjadi kelalang yang mengandungi enzim aktif, iaitu trypsin. Oleh kerana teknik ini membayangkan protokol trypsinization hangat, trypsin diletakkan pada suhu sekitar 37 ⁰C selama kira -kira empat jam.

Rajah 01: trypsin

Kandungan bercampur dan gelisah dengan menggunakan kaedah sentrifugasi untuk memudahkan protokol dan mempercepat proses pemisahan. Setelah masa yang disyorkan dicapai, sel -sel dapat diperoleh dari supernatan. Sel -sel yang diperoleh dari supernatan kemudian diinkubasi pada suhu dan masa tertentu.

Apa itu trypsinization sejuk?

Trypsinization sejuk adalah jenis trypsinization yang lain yang berlaku di bawah keadaan sejuk. Dalam teknik ini, sel -sel yang dicincang dan dibasuh diletakkan di dalam botol di atas ais dan kemudian direndam dengan trypsin. Tempoh perendaman lebih lama - kira -kira 6 - 24 jam.

Setelah selesai prosedur perendaman, trypsin dikeluarkan dari lysate sel, dan kepingan tisu diinkubasi selanjutnya pada 37 ⁰C selama kira -kira 20 - 30 minit. Penghantaran sel -sel dibawa oleh pipet berulang campuran tisu. Ini akan membolehkan sel -sel untuk memisahkan dari membran dan datang ke supernatan. Sebaik sahaja sel -sel berada dalam supernatan, mereka diinkubasi dan ditanam pada suhu dan masa yang dikehendaki.

Kaedah trypsinization sejuk mempunyai beberapa kelebihan

• Hasil sel yang lebih tinggi daripada kerosakan sel diminimumkan. Kerosakan sel diminimumkan dengan tidak menggunakan langkah sentrifugasi.
• Kaedah yang sangat mudah.
• Kurang susah payah.

Batasan utama kaedah trypsinization sejuk adalah bahawa kuantiti yang besar tidak dapat digunakan dalam satu keadaan.

Apakah persamaan antara trypsinization hangat dan sejuk?

• Kedua -dua proses trypsinization hangat dan sejuk menggunakan trypsin enzim untuk penyisihan sel.
• Kedua -dua proses trypsinization hangat dan sejuk digunakan dalam prosedur kultur sel untuk penyisihan sel.
• Dalam prosedur rawatan trypsinization yang hangat dan sejuk, sel -sel berasal dari supernatan.

Apakah perbezaan antara trypsinization hangat dan sejuk?

Ringkasan - Hangat vs Sejuk Trypsinization

Trypsinization adalah kaedah menggunakan trypsin enzim protein-merendahkan untuk penyisihan dan penyediaan budaya sel utama semasa proses kultur sel. Terdapat dua teknik utama trypsinization berdasarkan suhu yang digunakan semasa prosedur. Mereka adalah trypsinization hangat dan sejuk. Trypsinization hangat dijalankan pada 37 ⁰C sedangkan trypsinization sejuk dijalankan di bawah keadaan ais sejuk. Walaupun trypsinization sejuk memerlukan masa yang lebih lama untuk disiapkan, dikatakan mempunyai hasil sel yang lebih tinggi. Ini disebabkan oleh fakta bahawa kerosakan sel diminimumkan dalam trypsinization sejuk kerana ia tidak menggunakan langkah -langkah sentrifugasi yang kuat. Ini adalah perbezaan antara trypsinization hangat dan sejuk.

Rujukan:

1."Trypsinization."Trypsinization - Gambaran Keseluruhan | Topik Sciencedirect. Terdapat di sini 
2."Budaya Sel Utama: 3 Teknik (dengan Rajah)."Perbincangan Biologi, 16 Okt. 2015. Terdapat di sini  

Ihsan gambar:

1.'Trypsin Active Site'By Fdardel - Kerja Sendiri, (CC BY -SA 3.0) melalui Commons Wikimedia