Perbezaan antara immunofluorescence langsung dan tidak langsung

The Perbezaan utama antara immunofluorescence langsung dan tidak langsung ialah immunofluorescence langsung menggunakan antibodi tunggal yang berfungsi menentang sasaran minat sementara immunofluorescence tidak langsung menggunakan dua antibodi untuk melabelkan sasaran kepentingan.

Immunofluorescence atau pengimejan sel adalah teknik yang digunakan untuk melabelkan antigen sasaran tertentu dengan fluorophore. Di sini, fluorophore adalah sebatian kimia pendarfluor yang dapat mengemukakan semula cahaya pada pengujaan cahaya. Apabila fluorophore mengikat dengan antigen sasaran, ia membolehkan pengesanan molekul sasaran dalam sampel. Untuk menerangkannya lebih jauh, apabila antigen mengikat dengan antibodi tertentu, ia boleh dikonfirmasi dengan fluorophores. Oleh itu, mudah untuk mengesan kehadiran antigen sasaran dalam sampel ketika memerhatikan di bawah mikroskop pendarfluor.

Selain itu, terdapat dua jenis immunofluorescence; immunofluorescence langsung dan tidak langsung. Perbezaan antara immunofluorescence langsung dan tidak langsung terutamanya terletak pada bilangan antibodi yang digunakan dan konjugasi fluorofor. Iaitu, secara langsung immunofluorescence, fluorophore secara langsung konjugasi kepada antibodi utama manakala dalam immunofluorescence tidak langsung, konjugasi fluorophore dengan antibodi sekunder.

Kandungan

1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apakah immunofluorescence langsung
3. Apakah immunofluorescence tidak langsung
4. Persamaan antara immunofluorescence langsung dan tidak langsung
5. Perbandingan sampingan - langsung vs immunofluorescence tidak langsung dalam bentuk jadual
6. Ringkasan

Apakah immunofluorescence langsung?

Immunofluorescence menggunakan antibodi untuk mengesan antigen sasaran tertentu. Immunofluorescence langsung adalah salah satu daripada dua jenis immunofluorescence. Dalam immunofluorescence langsung, antibodi tunggal (antibodi utama) melibatkan dan fluorophore secara langsung konjugasi dengan antibodi utama. Apabila mengikat antibodi dengan antigen sasaran, fluorophore memancarkan pendarfluor yang dapat dikesan oleh mikroskop pendarfluor.

Rajah 01: immunofluorescence langsung

Walau bagaimanapun, immunofluorescence langsung adalah kaedah yang mahal kerana antibodi konjugasi utama mahal berbanding dengan antibodi sekunder. Walau bagaimanapun, ia tidak melibatkan langkah tambahan, oleh itu, teknik yang lebih pendek. Tambahan pula, pengikatan tidak spesifik dikurangkan dalam immunofluorescence langsung. Oleh itu, spesies silang reaktiviti rendah. Tetapi dalam pengesanan, sensitiviti immunofluorescence langsung lemah berbanding dengan immunofluorescence tidak langsung .

Apakah immunofluorescence tidak langsung?

Immunofluorescence tidak langsung adalah jenis kedua immunofluorescence yang melibatkan dua jenis antibodi seperti antibodi primer dan sekunder dalam pelabelan antigen sasaran. Dalam kaedah ini, fluorophore konjugasi dengan antibodi sekunder. Oleh itu, teknik ini melibatkan langkah tambahan.

Rajah 02: Immunofluorescence

Walau bagaimanapun, sensitiviti tinggi dalam kaedah ini kerana beberapa fluorophores dapat dikonjugasi kepada antibodi sekunder dan menjadikan pengesanan lebih mudah. Tambahan pula, immunofluorescence tidak langsung lebih murah kerana fakta bahawa konjugasi antibodi sekunder lebih murah dan lebih mudah. Sebagai perbandingan dengan immunofluorescence langsung, spesies silang reaktiviti tinggi dalam kaedah tidak langsung.

Apakah persamaan antara immunofluorescence langsung dan tidak langsung?

• Mereka adalah dua jenis teknik immunofluorescence.
• Antibodi utama dan fluorophore melibatkan kedua -dua kaedah.
• Juga, tindak balas antigen-antibodi berlaku dalam kedua-dua kaedah.
• Tambahan pula, kedua -dua immunofluorescence langsung dan tidak langsung menggunakan mikroskop pendarfluor untuk mengesan antigen.

Apakah perbezaan antara immunofluorescence langsung dan tidak langsung?

Immunofluorescence boleh langsung atau tidak langsung berdasarkan konjugasi fluorophore dengan antibodi yang digunakan. Dalam immunofluorescence langsung, fluorophore conjugates dengan antibodi utama, yang merupakan antibodi tunggal yang melibatkan dalam teknik ini. Berbeza dengan itu, dalam immunofluorescence tidak langsung, konjugasi fluorophore dengan antibodi sekunder, yang merupakan salah satu daripada dua jenis antibodi yang melibatkan teknik. Oleh itu, perbezaan utama antara immunofluorescence langsung dan tidak langsung adalah jenis antibodi yang konjugasi dengan fluorophore.

Infographic berikut memberikan perbandingan sampingan perbezaan antara immunofluorescence langsung dan tidak langsung.

Ringkasan -immunofluorescence langsung vs langsung

Immunofluorescence adalah teknik yang digunakan untuk mengesan kehadiran antigen tertentu dalam sampel. Teknik ini menggunakan antibodi tertentu. Oleh itu, dalam hal ini, antibodi konjugasi dengan fluorophores untuk mengesan mereka menggunakan mikroskop pendarfluor. Selain itu, terdapat dua jenis immunofluorescence iaitu immunofluorescence langsung dan tidak langsung. Immunofluorescence langsung melibatkan antibodi tunggal dan fluorophore secara langsung dikaitkan dengan antibodi ini. Immunofluorescence tidak langsung melibatkan dua antibodi; primer dan menengah dan fluorophore konjugasi ke antibodi sekunder. Oleh kerana beberapa antibodi sekunder dapat mengikat dengan antibodi utama dan beberapa fluorophores dapat konjugasi dengan antibodi sekunder, immunofluorescence tidak langsung adalah kaedah yang lebih sensitif daripada kaedah langsung. Tambahan pula, kaedah tidak langsung lebih murah daripada kaedah langsung. Oleh itu, ini adalah perbezaan antara immunofluorescence langsung dan tidak langsung.

Rujukan:

1."Immunofluorescence."Wikipedia, Yayasan Wikimedia, 19 Ogos. 2018. Terdapat di sini 

Ihsan gambar:

1."HSP jika IGA" oleh Emmanuelm di EN.Wikipedia, (CC oleh 3.0) melalui Commons Wikimedia
2."Immunofluorescence" oleh Westhayl618 - Kerja Sendiri, (CC BY -SA 4.0) melalui Commons Wikimedia