Perbezaan antara fokus kromatofocusing dan isoelektrik

The Perbezaan utama antara fokus kromatofocusing dan isoelektrik ialah Chromatofocusing adalah jenis kaedah kromatografi lajur yang menggunakan resin pertukaran ion manakala fokus isoelektrik adalah sejenis teknik elektroforesis yang menggunakan gel kecerunan pH yang tidak bergerak.

Fokus kromatofocusing dan isoelektrik adalah dua teknik yang memisahkan protein mengikut titik isoelektrik mereka. Kedua -dua fokus kromatofocusing dan isoelektrik mempunyai kuasa menyelesaikan yang hebat. Chromatofocusing adalah kaedah kromatografi lajur resolusi tinggi manakala fokus isoelektrik adalah kaedah pemisahan elektroforetik. Selain itu, chromatofocusing tidak menggunakan medan elektrik manakala isoelektrik fokus memerlukan medan elektrik.

Kandungan

1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apa itu chromatofocusing 
3. Apa yang difokuskan oleh isoelektrik
4. Persamaan antara fokus kromatofocusing dan isoelektrik
5. Perbandingan sampingan - Chromatofocusing vs isoelektrik yang memberi tumpuan kepada bentuk jadual
6. Ringkasan

Apa itu chromatofocusing?

Chromatofocusing adalah sejenis kromatografi elusi tinggi yang memisahkan protein mengikut perbezaan di titik isoelektrik mereka. Ia menggunakan lajur resin pertukaran ion dan kecerunan pH yang dibangunkan secara dalaman. Tidak seperti fokus isoelektrik, kromatofocusing tidak melibatkan medan elektrik. Chromatofocusing adalah teknik pembersihan yang kuat yang dapat menyelesaikan molekul yang sangat serupa walaupun hanya berbeza dengan 0.02 unit pH. Oleh itu, chromatofocusing paling sesuai sebagai langkah penggilap terakhir apabila resolusi tinggi diperlukan dalam memisahkan komponen yang sangat serupa.

Dalam chromatofocusing, sampel digunakan pada lajur dengan mencampurkannya dengan penampan permulaan. Protein yang berada di pH di atas titik isoelektrik mereka dikenakan secara negatif dan mereka tetap berada di bahagian atas lajur manakala protein lain yang berada di pH di bawah titik isoelektrik mereka, berhijrah ke lajur. Protein dengan titik isoelektrik tertinggi dielakkan terlebih dahulu manakala protein dengan titik isoelektrik terendah dielakkan terakhir dari lajur. Teknik ini dipengaruhi oleh beberapa faktor seperti pemendakan protein dan linearity gradien pH.

Apa yang difokuskan oleh isoelektrik?

Fokus Isoelektrik adalah teknik yang memisahkan molekul yang berbeza berdasarkan titik isoelektrik mereka. Ia juga dikenali sebagai electrofocusing. Teknik ini sering digunakan untuk pemisahan protein dalam gel. Dalam fokus isoelektrik, sampel dimasukkan ke dalam gel kecerunan pH yang tidak bergerak (IPG). IPG Gel adalah kopolimer matriks gel acrylamide dengan kecerunan pH. Protein berhijrah ke arah katod sehingga mereka mendapati rantau pH titik isoelektrik mereka. Apabila protein mencapai pH yang tidak mempunyai caj bersih, penghijrahan berhenti dan memberikan band pegun. Begitu juga, setiap protein memberikan band pada satu titik dalam kecerunan pH yang sepadan dengan titik isoelektriknya.

Rajah 01: Fokus isoelektrik

Fokus Isoelektrik adalah langkah pertama elektroforesis gel dua dimensi. Dalam teknik itu, protein pertama kali dipisahkan mengikut titik isoelektrik mereka oleh fokus isoelektrik dan kemudian dipisahkan oleh berat molekul mereka melalui SDS-PAGE.

Apakah persamaan antara fokus kromatofocusing dan isoelektrik?

• Fokus kromatofocusing dan isoelektrik adalah dua kaedah yang sangat baik.
• Kedua -duanya didasarkan pada titik protein isoelektrik.
• Teknik ini menggunakan kecerunan pH.
• Kedua -dua prosedur itu bermaklumat untuk pencirian varian hemoglobin manusia.
• Mereka dapat menyelesaikan molekul di mana nilai pi berbeza dengan sedikit sebanyak 0.02 unit pH.

Apakah perbezaan antara fokus kromatofocusing dan isoelektrik?

Chromatofocusing adalah teknik kromatografi lajur resolusi tinggi yang memisahkan protein mengikut titik isoelektrik mereka. Sebaliknya, fokus isoelektrik adalah teknik elektroforetik yang memisahkan protein mengikut titik isoelektrik mereka dengan penggunaan medan elektrik di sepanjang kecerunan pH yang terbentuk dalam kapilari. Jadi, ini adalah perbezaan utama antara fokus kromatofocusing dan isoelektrik.

Satu lagi perbezaan antara kromatofocusing dan fokus isoelektrik adalah bahawa kromatofocusing tidak melibatkan medan elektrik manakala isoelektrik fokus memerlukan medan elektrik.

Ringkasan -Chromatofocusing vs isoelektrik memfokuskan

Fokus kromatofocusing dan isoelektrik adalah dua teknik serupa yang mempunyai keupayaan molekul yang tinggi, terutama molekul yang sangat serupa. Chromatofocusing adalah teknik kromatografi lajur resolusi tinggi manakala fokus isoelektrik adalah kaedah elektroforesis. Kromatofocusing tidak melibatkan medan elektrik, tidak seperti fokus isoelektrik. Oleh itu, ini meringkaskan perbezaan antara fokus kromatofokus dan isoelektrik.

Rujukan:

1. "Chromatofocusing: Prinsip dan Kaedah."Sigma, boleh didapati di sini.
2. "Fokus isoelektrik". En.Wikipedia.Org, 2020, boleh didapati di sini.

Ihsan gambar:

1. "Isoelektrik Fokus Sumbangan2" oleh MRBean427 - Kerja Sendiri (CC BY -SA 3.0) melalui Commons Wikimedia