Perbezaan antara vektor phage YAC dan M13
Perbezaan utama - YAC vs M13 Phage Vector
Pengklonan DNA adalah proses penting yang membolehkan penyebaran serpihan DNA penting organisma. Ia memerlukan menyertai DNA tertentu dengan DNA vektor untuk mewujudkan DNA rekombinan yang berubah menjadi organisma tuan rumah. Vektor adalah molekul DNA yang bertindak sebagai kenderaan untuk membawa bahan genetik asing ke sel atau organisma lain. Ia harus mampu mereplikasi di dalam organisma tuan rumah dan menghasilkan pelbagai salinan DNA rekombinan. Terdapat pelbagai jenis vektor yang digunakan dalam pengklonan DNA. Kromosom buatan ragi (YAC) dan vektor phage M13 adalah dua jenis di antara mereka. Perbezaan utama antara vektor phage YAC dan M13 ialah YAC adalah kromosom buatan yang mereplikasi dalam sel yis manakala Vektor phage M13 adalah satu DNA bulat terkandas bacteriophage M13 yang mereplikasi di E coli sel.
Kandungan
1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apa itu yac
3. Apakah vektor phage m13
4. Perbandingan sampingan - yac vs m13 vektor phage
5. Ringkasan
Apa itu vektor yac?
YAC adalah kromosom buatan yang mempunyai keupayaan untuk membawa segmen besar DNA asing dan meniru dalam sel yis. Ia mempunyai urutan centromere, telomere dan autonomi yang menepati penting untuk replikasi dan kestabilan. YAC juga harus menanggung penanda selektif atau penanda dan tapak sekatan untuk menjadikannya vektor pengklonan yang berkesan. Urutan besar antara 1000 kb hingga 2000 kb boleh dimasukkan ke dalam yac dan dipindahkan ke yis.
Rajah 01: vektor yac
Apakah vektor phage m13?
Bacteriophage M13 adalah virus yang menjangkiti dan mereplikasi di E coli. Genom bacteriophage M13 adalah saiz kecil, kira -kira 6.7 kb. Ia adalah DNA rasa yang terkandas, bulat dan positif. Virus ini secara khusus menjangkiti E coli Bakteria melalui F Pilus. Sebaik sahaja ia memasuki ssDNA ke dalam bakteria, ia mensintesis helai pelengkapnya dan menjadi dsDNA atau bentuk replika (RF) M13. RF boleh berkelakuan seperti plasmid dalam organisma tuan rumah. DsDNA mereplikasi dalam E coli dan menghasilkan ssDNA yang membawa phages baru. Phages baru ini terus dikeluarkan dari E coli tanpa membunuh sel tuan rumah. Walau bagaimanapun, jangkitan melambatkan pertumbuhan e coli. dsDNA boleh diekstrak dari sel bakteria dan digunakan sebagai vektor dalam pengklonan DNA. Mereka dikenali sebagai vektor phage M13. Mereka boleh dimanipulasi dengan mudah dan digunakan sama dengan vektor plasmid.
Keupayaan jangkitan phages M13 ini berfungsi sebagai kelayakan yang baik untuk digunakan sebagai vektor dalam pengklonan gen. Semasa mengembangkan M13 menjadi vektor, beberapa elemen harus dimasukkan ke dalam genomnya. Mereka, gen untuk penindas LAC (LAC I) protein, rantau pengendali-proximal lac z Gen, promoter LAC dan tapak pengklonan berganda (PolyLinker). Apabila dsDNA dari M13 digunakan sebagai vektor, ia boleh dianggap sebagai vektor plasmid. Walau bagaimanapun, penggunaan ssDNA M13 mempunyai kelebihan dalam penjujukan DNA dan mutagenesis yang diarahkan oleh tapak.
Oleh kerana vektor phage M13 menanggung pelbagai tapak pengklonan di lacz rantau, vektor rekombinasi dapat dikenal pasti dengan mudah oleh pemeriksaan koloni biru/putih pada plat agar yang mengandungi IPTG dan X-Gal. Plak biru yang dihasilkan di atas pinggan tidak mengandungi phages yang dikombinasikan. Oleh itu, phages dengan sisipan boleh dipilih untuk tujuan pengklonan.
Rajah 02: Bacteriophage M13
Apakah perbezaan antara vektor phage YAC dan M13?
Yac vs m13 phage vektor | |
| YAC adalah kromosom kejuruteraan genetik yang mempunyai keupayaan untuk membawa segmen besar DNA asing dan meniru dalam sel yis. | Vektor phage M13 adalah vektor virus yang dibangunkan oleh bacteriophage M13 yang digunakan untuk memasukkan DNA asing ke E coli. |
| Tujuan | |
| YACs direka untuk mengklon serpihan besar DNA genomik ke dalam ragi. | Vektor phage M13 digunakan untuk memasukkan DNA asing ke E coli. |
| Masukkan panjang | |
| YACs boleh mengandungi sisipan genomik bersaiz megabase (1000 kb - 2000 kb). | Saiz sisipan adalah kira -kira 1,500 bps. |
| Pembinaan | |
| DNA YAC sukar untuk membersihkan utuh dan memerlukan kepekatan yang tinggi untuk menjana sistem vektor YAC. | Ia berlaku melalui rantai elektron fotosintesis kitaran. |
| Kestabilan | |
| Yac tidak stabil. | Phages M13 boleh diekstrak dengan mudah. |
| Saiz | |
| Enzim adalah molekul yang lebih besar. | Phages m13 stabil daripada yac. |
Ringkasan - YAC vs M13 Phage Vector
YAC adalah sistem vektor yang dibina buatan dengan menggunakan rantau kromosom yis tertentu untuk memasukkan segmen besar bahan genetik ke sel yis. Vektor phage M13 adalah sistem vektor yang diperolehi daripada bacteriophage m 13 yang menggunakan E coli Sebagai organisma tuan rumah. Ini adalah perbezaan utama antara vektor phage YAC dan M13. Kedua -duanya sama -sama berguna dalam teknologi DNA rekombinan dan pengklonan gen.
Rujukan:
1."Vektor."Nota Genetik - Vektor. N.p., n.d. Web. 16 Mei 2017. https: // notes genetik.Wikispaces.com/vektor
2."Kromosom buatan ragi."Wikipedia. Yayasan Wikimedia, 21 Apr. 2017. Web. 16 Mei 2017. .
Ihsan gambar:
1. "M13b" oleh J3D3 - Kerja Sendiri (CC BY -SA 3.0) melalui Commons Wikimedia
