Perbezaan antara gel susunan dan pemisahan gel
Perbezaan utama - Menyusun gel vs memisahkan Gel
Istilah yang menyusun gel dan pemisahan gel digunakan dalam menerangkan teknik SDS-PAGE. SDS-PAGE atau natrium dodecyl sulfat-polyacrylamide gel elektroforesis adalah teknik makmal yang digunakan untuk memisahkan molekul protein berdasarkan berat molekul mereka. Teori di sebalik teknik ini ialah protein dengan berat molekul yang berbeza menunjukkan kadar penghijrahan yang berbeza; Molekul berat molekul rendah berhijrah lebih cepat manakala molekul berat molekul yang tinggi berhijrah perlahan -lahan. Medium untuk penghijrahan adalah gel. Terdapat dua jenis gel yang dinamakan sebagai gel susunan dan memisahkan gel. The Perbezaan utama antara gel menyusun dan pemisahan gel adalah pH gel penyusun adalah 6.8 manakala pH gel pemisahan adalah 8.8.
Kandungan
1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apa yang menyusun gel
3. Apa yang memisahkan gel
4. Hubungan antara gel menyusun dan memisahkan gel
5. Perbandingan sampingan - menyusun gel vs pemisahan gel dalam bentuk jadual
6. Ringkasan
Apa yang menyusun gel?
Gel Stacking adalah gel polyacrylamide pekat rendah yang diletakkan di atas gel penyelesaian yang lebih pekat (pemisahan gel) dalam teknik SDS-PAGE. Gel penyusunan digunakan untuk meningkatkan resolusi elektroforesis. Resolusi meningkat kerana perbezaan antara kepekatan gel susunan dan menyelesaikan gel yang mempengaruhi protein dalam sampel. Oleh kerana kepekatan polyacrylamide dalam gel susunan rendah, saiz liang lebih tinggi. Ini juga membantu meningkatkan pemisahan.
Gel penyusunan adalah gel polyacrylamide longgar dengan liang besar kira -kira 7% polyacrylamide. Liang -liang ini tidak bertindak sebagai penghalang yang besar untuk molekul protein yang besar. Oleh itu gel ini memberi sedikit kesan kepada pergerakan protein tersebut. Ini menjadikan pemisahan mengikut pergerakan dan saiz protein dengan menumpukan perhatiannya di antara dua gel.
Rajah 01: Gel acrylamide SDS-PAGE
PH gel penyusun adalah 6.8. PHnya berasid daripada gel menyelesaikannya dengan 2 unit pH. PH ini membayangkan kekuatan ionik yang lebih rendah sehingga rintangan elektrik yang lebih tinggi. Ini menimbulkan pergerakan protein daripada zarah -zarah lain yang ada di dalam gel.
Apa yang memisahkan gel?
Memisahkan gel atau menyelesaikan gel SDS-Pagetechnique adalah gel polyacrylamide yang sangat pekat yang diletakkan di atas gel susunan pekat rendah. Gel yang memisahkan mengandungi jumlah polyacrylamide yang tinggi (10%). PH gel ini dikekalkan sebagai pH = 8.8, yang merupakan tahap pH yang lebih tinggi daripada gel susunan.
Rajah 02: Alat elektroforesis gel
Apabila molekul protein mencapai gel pemisahan, penghijrahan molekul tersebut diperlahankan kerana gel pemisahan adalah gel kepekatan yang tinggi dengan saiz liang kecil yang boleh bertindak sebagai halangan yang besar untuk pergerakan molekul protein. Ini perlahan membolehkan protein lain berpindah perlahan -lahan untuk mengejar, mengakibatkan band yang sempit dan tertumpu di antara kedua -dua gel.
Apakah hubungan antara gel menyusun dan memisahkan gel?
- Kedua -dua gel yang menyusun dan memisahkan jenis gel digunakan dalam alat yang sama.
Apakah perbezaan antara gel menyusun dan memisahkan gel?
Menyusun gel vs pemisahan gel | |
| Gel Stacking adalah gel polyacrylamide pekat rendah yang diletakkan di atas gel penyelesaian yang lebih pekat (pemisahan gel) dalam teknik SDS-PAGE. | Memisahkan gel atau menyelesaikan gel teknik SDS-PAGE adalah gel polyacrylamide yang sangat pekat yang diletakkan di atas gel susunan yang rendah. |
| Penempatan | |
| Gel menyusun diletakkan pada gel penyelesaian (memisahkan). | Memisahkan gel diletakkan di bahagian bawah bekas yang digunakan untuk elektroforesis gel. |
| Konsentrasi | |
| Kepekatan gel susunan tinggi. | Kepekatan pemisahan gel rendah. |
| Kandungan polyacrylamide | |
| Gel menyusun mengandungi kira -kira 7% polyacrylamide. | Memisahkan gel mengandungi kira -kira 10% polyacrylamide. |
| Ph | |
| PH gel penyusun adalah 6.8. | PH gel pemisahan adalah 8.8. |
| Saiz liang | |
| Saiz liang besar hadir dalam gel susunan. | Saiz liang kecil hadir dalam memisahkan gel. |
| Resolusi | |
| Menyusun gel memberikan resolusi yang lebih baik. | Memisahkan gel memberikan resolusi yang buruk. |
Ringkasan - Menyusun gel vs memisahkan Gel
Menyusun gel dan pemisahan gel adalah dua jenis gel polyacrylamide yang digunakan untuk mendapatkan pemisahan molekul protein yang lebih baik dalam sampel tertentu. Perbezaan antara gel susunan dan pemisahan gel adalah bahawa pH gel penyusun adalah 6.8 manakala pH gel pemisahan adalah 8.8.
Rujukan:
1."Elektroforesis gel polyacrylamide."Elektroforesis gel polyacrylamide (teori): Biologi Molekul Makmal Maya II: Kejuruteraan Bioteknologi dan Bioperubatan: Amrita Vishwa Vidyapeetham Lab Virtual. Terdapat di sini
2."Bagaimana SDS-PAGE berfungsi."Bio Bio, 16 Feb. 2018. Terdapat di sini
3."SDS-PAGE Gel Stacking-Bich 608 (Polymenis-Pettigrew)."Tapak Google. Terdapat di sini
Ihsan gambar:
1.'SDS-PAGE Acrylamide Gel'by Bensaccount di Bahasa Inggeris Wikipedia, (CC oleh 3.0) melalui Commons Wikimedia
2.'Gel Electrophoresis Apparatus' oleh Jeffrey M. Vinocur - Kerja Sendiri, (CC -BY 2.5) Melalui Wikimedia Commons
