Perbezaan antara RP HPLC dan HIC
The Perbezaan utama Antara RP HPLC dan HIC ialah RP HPLC menggunakan fasa mudah alih yang lebih kutub dan fasa pegun polar yang kurang. Sedangkan HIC menggunakan fasa pegun hidrofobik yang membolehkan molekul hidrofobik melekat padanya.
Kromatografi adalah teknik analisis yang membantu memisahkan campuran ke dalam komponennya. Pertama, kita harus membubarkan sampel untuk dipisahkan menjadi penyelesaian. Campuran penyelesaian penyelesaian ini dipanggil fasa mudah alih. Kemudian fasa mudah alih dilalui melalui bahan lain yang disebut fasa pegun. Fasa pegun menentukan pemisahan komponen. Pemisahan berlaku disebabkan oleh pembahagian bahan antara fasa mudah alih dan fasa pegun.
Kandungan
1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apa itu RP HPLC
3. Apa itu HIC
4. Perbandingan sampingan -RP HPLC vs. Hic dalam bentuk jadual
5. Ringkasan
Apa itu RP HPLC?
Istilah RP HPLC bermaksud Fasa terbalik Kromatografi cecair berprestasi tinggi. Ia melibatkan pemisahan komponen dalam campuran, mengikut hidrofobik. Komponen hidrofobik dalam pautan fasa mudah alih dengan ligan hidrofobik yang tidak bergerak pada fasa pegun, manakala komponen hidrofilik elute melalui fasa pegun tanpa melekat pada permukaan fasa pegun.
Rajah 01: Alat HPLC
Selain itu, kaedah ini mempunyai lebih banyak kebolehulangan berbanding dengan teknik kromatografi lain, dan ia menunjukkan kebolehgunaan yang luas juga. Oleh itu, kami menggunakan kaedah ini di makmal selama lebih dari 75% daripada semua kaedah HPLC. Kebanyakan masa, kami menggunakan campuran air berair dengan pelarut organik kutub yang larut sebagai fasa mudah alih. Oleh itu, ia akan memastikan lampiran komponen hidrofobik dalam penyelesaian ke permukaan fasa pegun.
Apa itu HIC?
Istilah HIC bermaksud Kromatografi interaksi hidrofobik. Ia adalah jenis fasa terbalik HPLC, dan kaedah ini digunakan terutamanya untuk pemisahan biomolekul besar seperti protein. Dalam kaedah ini, kita perlu menggunakan medium berair untuk membuat sampel biomolekul. Ini kerana pelarut organik boleh menyebabkan penolakan protein. Selain itu, teknik ini menggunakan interaksi antara molekul besar dengan permukaan hidrofobik yang sedikit dari fasa pegun. Tambahan pula, kita perlu menggunakan kepekatan garam yang tinggi dalam sampel kerana ia menggalakkan protein untuk dikekalkan pada pembungkusan; Proses ini dipanggil Salting Out. Dengan mengurangkan kepekatan garam secara beransur -ansur, kita dapat membuat biomolekul elute secara berasingan mengikut hidrofobisitas mereka.
Biasanya, kaedah ini menggunakan syarat-syarat yang bertentangan dengan kromatografi pertukaran ion. Dalam teknik ini, pertama, kita perlu lulus penyelesaian penampan melalui lajur untuk mengurangkan larutan larut dalam sampel. Ia menjadikan kawasan hidrofobik protein untuk mendedahkan. Walau bagaimanapun, apabila molekul lebih hidrofobik, garam kurang diperlukan untuk mempromosikan pengikatan. Di sini, larutan hidrofobik yang kurang dielakkan terlebih dahulu, dan menurut perubahan kepekatan garam, lebih banyak larutan hidrofobik dielakkan terakhir.
Apakah perbezaan antara RP HPLC dan HIC?
Kromatografi adalah teknik analisis untuk pemisahan komponen dalam campuran. RP HPLC dan HIC adalah dua teknik kromatografi khusus. Perbezaan utama antara RP HPLC dan HIC ialah RP HPLC menggunakan fasa mudah alih yang lebih kutub dan fasa pegun polar yang kurang, manakala HIC menggunakan fasa pegun hidrofobik, yang membolehkan molekul hidrofobik melampirkan kepadanya.
Infographic di bawah meringkaskan perbezaan antara RP HPLC dan HIC.
Ringkasan -RP HPLC vs. HIC
Kromatografi adalah teknik analisis untuk pemisahan komponen dalam campuran. RP HPLC dan HIC adalah dua teknik kromatografi khusus. Perbezaan utama antara RP HPLC dan HIC ialah RP HPLC menggunakan fasa mudah alih yang lebih kutub dan fasa pegun polar yang kurang, sedangkan HIC menggunakan fasa pegun hidrofobik, yang membolehkan molekul hidrofobik melekat padanya kepadanya.
Rujukan:
1. "Mod pemisahan HPLC."Perairan, boleh didapati di sini.
Ihsan gambar:
1. "HPLC Preparative" oleh Gyassinemrabettalk✉This W3C-tidak ditentukan imej vektor dicipta dengan inkscape. - Kerja Sendiri (CC oleh 3.0) melalui Commons Wikimedia
