Perbezaan antara probe radioaktif dan nonradioaktif

The Perbezaan utama antara probe radioaktif dan tidak aktif ialah Probe radioaktif adalah urutan DNA atau RNA terkandas tunggal yang dilabelkan dengan isotop radioaktif manakala probe tidak aktif adalah urutan DNA tunggal atau RNA yang dilabelkan dengan tag kimia atau tag neon.

Hibridisasi asid nukleik adalah teknik penting dalam biologi molekul, terutamanya dalam diagnosis mikroba. Ia membantu mengenal pasti atau mengesan urutan asid nukleik tertentu. Dalam teknik ini, asid nukleik ditetapkan ke permukaan pepejal dan hibrida dengan siasatan. Siasatan adalah serpihan DNA atau RNA yang melengkapi dengan urutan minat. Sekiranya urutan sasaran hadir dalam sampel, siasatan akan hibridisasi dengannya dan menjadikannya dapat dikesan. Terdapat dua jenis probe sebagai probe radioaktif dan tidak aktif. Oleh itu, kita boleh menandakan probe dengan tag radioaktif atau tag pendarfluor.

Kandungan

1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apakah probe radioaktif
3. Apakah probe nonradioaktif
4. Persamaan antara probe radioaktif dan nonradioaktif
5. Perbandingan sampingan - Radioaktif vs Probe Nonradioaktif dalam Bentuk Tabular
6. Ringkasan

Apakah probe radioaktif?

Probe Radioaktif adalah serpihan DNA tunggal atau RNA dengan tag radioaktif. Radioisotop digunakan dalam menyediakan pemeriksaan radioaktif. Radioisotop ³²P, ³³P dan ³⁵S biasanya digunakan dalam pelabelan probe. Selain itu, radioisotop ³H dan ¹²⁵1 juga digunakan pada tahap yang lebih rendah dalam pelabelan probe. Tetapi mereka digunakan untuk aplikasi tertentu. Antara radioisotop yang berbeza, ³²P adalah isotop yang paling biasa digunakan dalam pelabelan probe radioaktif.

Probe radioaktif memberikan tahap kebolehpercayaan dan kekhususan yang lebih tinggi. Oleh itu, mereka memberikan kepekaan maksimum dan membenarkan kuantifikasi urutan sasaran yang tepat. Walau bagaimanapun, terdapat beberapa kelemahan yang berkaitan dengan probe radioaktif. Mereka mempunyai separuh hayat pendek. Selain itu, mereka berbahaya dan pengeluaran, penggunaan dan pelupusan adalah bermasalah semasa mengendalikan. Di samping itu, penyediaan siasatan radioaktif adalah proses yang mahal. Oleh itu, disebabkan isu keselamatan dan kos, probe radioaktif tidak digunakan sebagai probe nonradioaktif pada masa kini.

Apakah probe nonradioaktif?

Probe Nonradioaktif adalah jenis probe kedua yang dilabel secara kimia. Digoxigenin adalah siasatan nonradioaktif, yang merupakan penanda berasaskan antibodi. Probe digoxigenin adalah khusus dan sensitif. Biotin adalah label lain yang digunakan dalam penyediaan siasatan nonradioaktif. Sistem pengesan biotin/streptavidin dan digoxigenin/antibodi adalah probe nonradioaktif yang paling biasa digunakan dalam hibridisasi. Tambahan pula, sistem peroksidase lobak adalah satu lagi sistem siasatan nonradioaktif. Sebaik sahaja probe nonradioaktif ini hibridisasi dengan urutan sasaran, mereka dapat dikesan melalui autoradiografi atau teknik pengimejan lain.

Rajah 01: Hibridisasi dengan Probe Nonradioaktif

Probe nonradioaktif digunakan lebih kerap dalam hibridisasi asid nukleik daripada probe radioaktif. Ini kerana probe nonradioaktif tidak dikaitkan dengan bahan berbahaya. Tambahan pula, kaedah pengesanan nonradioaktif memerlukan masa pendedahan yang lebih pendek untuk mengesan isyarat hibridisasi. Walau bagaimanapun, langkah-langkah yang terlibat dalam hibridisasi DNA dengan probe nonradioaktif biasanya membosankan dan memakan masa. Selain itu, penyelesaian yang tersedia secara komersil mahal.

Apakah persamaan antara probe radioaktif dan tidak aktif?

• Probe radioaktif dan tidak aktif adalah dua jenis probe yang digunakan dalam hibrida asid nukleik.
• Mereka memudahkan pengesanan urutan sasaran dalam sampel.
• Kedua -dua jenis probe sama -sama sensitif dan spesifik.

Apakah perbezaan antara probe radioaktif dan tidak aktif?

Probe radioaktif adalah urutan DNA atau RNA tunggal yang dilabelkan dengan isotop radioaktif, sementara probe tidak aktif adalah urutan DNA tunggal atau RNA yang dilabelkan dengan tag kimia. Jadi, ini adalah perbezaan utama antara probe radioaktif dan tidak aktif. Juga, isotop radioaktif berbahaya. Oleh itu, probe radioaktif sangat berbahaya, sementara probe tidak aktif tidak berbahaya.

Selain itu, perbezaan lain antara probe radioaktif dan tidak aktif adalah kelemahan mereka. Half-hayat pendek dan bahaya yang dikaitkan dengan pengeluaran, penggunaan dan pelupusan mereka adalah kelemahan menggunakan probe radioaktif. Sebaliknya, langkah-langkah yang terlibat dalam hibridisasi DNA dengan probe nonradioaktif biasanya membosankan dan memakan masa.

Di bawah infographic menunjukkan lebih banyak perbandingan yang berkaitan dengan perbezaan antara probe radioaktif dan tidak aktif.

Ringkasan -Radioaktif vs Probes Nonradioaktif

Siasatan adalah serpihan DNA atau RNA yang mengandungi urutan nukleotida yang melengkapi urutan kepentingan. Untuk mengesan urutan sasaran, probe boleh dilabelkan secara radioaktif, fluoresen atau kimia. Probes mengikat dengan urutan pelengkap dalam sampel. Probe radioaktif dilabelkan dengan isotop radioaktif manakala probe nonradioaktif dilabelkan dengan biotin, digoxigenin atau peroksidase lobak. Oleh itu, ini adalah perbezaan utama antara probe radioaktif dan tidak aktif.

Rujukan:

1. "Siasatan hibridisasi". En.Wikipedia.Org, 2020, boleh didapati di sini.

Ihsan gambar:

1. "Hasil hibridisasi situ kromosom x dan y bac probes" oleh Joanne h. Hsu, Hui Zeng, Kalistyn H. Lemke, Aris a. Polyzos, jingly f. Weier, Mei Wang, Anna R. Lawin-O'Brien, Heinz-Ulrich G. Weier dan Benjamin O'Brien - Joanne H. Hsu et al. "DNA khusus kromosom berulang: pengenalan pesat dalam silico dan pengesahan menggunakan pendarfluor in situ hibridisasi" int. J. Mol. Sci. 2013, 14 (1), 57-71; doi: 10.3390/IJMS14010057 (CC oleh 3.0) melalui Commons Wikimedia