Perbezaan antara phusion dan taq polimerase

Perbezaan utama - Phusion vs Taq Polimerase
 

Polimerase DNA digunakan secara meluas dalam teknik biologi molekul dan juga secara semula jadi hadir dalam semua organisma yang menjalani replikasi DNA. Mereka adalah enzim pempolimeran utama yang melibatkan semasa replikasi. Polimerase DNA mampu menambahkan nukleotida ke hujung 3 'bebas dari helai DNA sehingga menyebabkan lanjutan helai baru. Pada masa ini, disebabkan perkembangan biologi molekul dalam diagnostik penyakit dan aplikasi perindustrian, adalah penting untuk mengeluarkan polimerase yang mempunyai pelbagai sifat bermanfaat. Ini meningkatkan ketepatan kaedah dan menjadikannya teknik yang lebih cepat. Phusion dan Taq Polymerase adalah dua enzim polimerase termostable yang dihasilkan secara komersil yang digunakan dalam aplikasi molekul khas. Phusion adalah polimerase DNA yang diasingkan dari Pyrococcus furiosus dan terutamanya digunakan dalam eksperimen pengklonan untuk meningkatkan kesetiaan. Polimerase DNA Taq adalah polimerase DNA standard yang digunakan dalam tindak balas rantai polimerase (PCR), dan ia diasingkan dari bakteria termostable; Thermus Aquaticus. The Perbezaan utama Antara kedua -dua enzim adalah sumber mikroorganisma. Phusion diasingkan dari ekstremofil, Pyrococcus furiosus sedangkan, polimerase taq diasingkan dari termophile, Thermus Aquaticus.

Kandungan

1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apa itu phusion
3. Apakah polimerase Taq
4. Persamaan antara phusion dan taq polimerase
5. Perbandingan sampingan - Phusion vs Taq Polymerase dalam bentuk jadual
6. Ringkasan

Apa itu phusion?

Phusion DNA polimerase adalah polimerase novel yang dihasilkan dengan mengasingkan enzim dari Pyrococcus furiosus, yang merupakan archaea ekstremofilik. Mikrob ini berada dalam keadaan suhu yang sangat tinggi, dengan itu menjadikan polimerase polimerase yang sangat panas. Phusion polimerase digunakan untuk mendapatkan kesetiaan yang melampau ke atas polimerase termostable konvensional; TAQ Polimerase. Polimerase Phusion mampu menguatkan templat panjang sehingga 7.5KB DNA genomik. Kapasiti pempolimeran optimum polimerase phusion adalah pada 72⁰ C. Phusion juga digunakan dalam produk pengklonan untuk penjujukan, analisis ekspresi dan analisis mutasi.

Polimerase DNA Phusion mempunyai aktiviti exonuclease 3 ' - 5'. Ini membolehkan pembacaan proofreading helai yang baru disintesis selepas sintesis. Oleh itu, ketidakcocokan nukleotida mudah diperbaiki. Oleh itu, ia mempunyai kadar ralat yang lebih rendah. Kelebihan keseluruhan phusion polimerase adalah;

• Kesetiaan yang melampau
• Kelajuan tinggi dan mengurangkan masa lanjutan
• Reaksi yang mantap dan memerlukan pengoptimuman yang minimum
• Hasil yang tinggi

Rajah 01: Fusion

Kelemahan utama polimerase phusion adalah bahawa ia dihalang dengan kehadiran deoxyuridine triphosphate (DUTP). Apabila DUTPs terkumpul dalam campuran tindak balas, ia boleh menghalang tindakan polimerase phusion. Ini dicegah dengan merawat campuran tindak balas dengan dutPase sebelum menambahkan enzim. Pada masa ini, varian tahan DUTP polimerase phusion yang dikenali sebagai PFU Turbo digunakan bukannya polimerase phusi.

Apakah polimerase Taq?

TAQ DNA polimerase Ciptaan telah merevolusikan bidang biologi molekul. Ia menyelesaikan masalah besar dalam penguatan DNA. Polimerase DNA Taq adalah enzim polimerase haba yang stabil diekstrak dan diasingkan dari bakteria thermophilic, Thermus Aquaticus. Penemuan enzim ini membawa kepada pembangunan PCR. Enzim ini telah membolehkan penggunaan tindak balas rantai polimerase dalam penguatan DNA dan bukannya teknik pengklonan yang konvensional. PCR kini digunakan dalam diagnostik molekul, bidang pertanian dan perindustrian dengan banyak variasi baru yang ditambah kepada teknik.

Rajah 02: Polimerase Taq

Fungsi polimerase DNA Taq pada julat suhu optimum antara 72⁰C - 80⁰C. Polimerase DNA Taq memerlukan faktor bersama; magnesium untuk fungsinya. TAQ polimerase tidak mempunyai keupayaan proofreading 3 ' - 5', oleh itu, kadar ralat polimerase DNA Taq adalah tinggi berbanding dengan jenis polimerase DNA yang lebih baru seperti polimerase phusion dan lain -lain dan lain -lain. Tetapi, populariti polimerase DNA Taq tetap sama di seluruh dunia sains kerana kemudahan dan fleksibiliti enzim.

Apakah persamaan antara phusion dan polimerase Taq?

• Kedua -dua enzim phusion dan taq polimerase adalah enzim pempolimeran yang mampu menambahkan nukleotida ke akhir 3 'helai DNA.
• Kedua -dua polimerase phusion dan taq memerlukan urutan primer untuk memulakan pempolimeran.
• Kedua -dua polimerase phusion dan taq stabil haba.
• Kedua -dua polimerase phusion dan taq digunakan dalam mekanisme PCR untuk menguatkan DNA.
• Apabila menambah polimerase ke campuran tindak balas, kedua -dua polimerase phusion dan taq ditambah terakhir untuk memastikan kecekapan enzim.
• Kedua -dua polimerase phusion dan taq disintesis secara komersil untuk tujuan eksperimen biologi molekul.
• Kedua -dua polimerase phusion dan taq memerlukan cofactor untuk menyelesaikan fungsinya.

Apakah perbezaan antara phusion dan taq polimerase?

Ringkasan - Phusion vs Taq polimerase

Phusion dan Taq DNA polimerase adalah dua polimerase stabil haba yang digunakan dalam teknik PCR. Phusion adalah polimerase yang diasingkan dari ekstremofil, Pyrococcus furiosus sedangkan, Taq diasingkan dari bakteria termostable Thermus Aquaticus. Penemuan Polimerase DNA Taq membawa kepada ciptaan PCR. Phusion mempunyai banyak kelebihan ke atas Taq yang telah menjadikan Phusion pilihan yang lebih baik dalam menghasilkan DNA kesetiaan yang tinggi. Walau bagaimanapun, polimerase Taq masih digunakan sebagai enzim polimerase standard dalam PCR. Ini adalah perbezaan antara phusion dan taq polimerase.

Rujukan:

1.Biolabs, New England. "Polimerase DNA Taq."New England Biolabs: Reagen untuk Industri Sains Hayat. Terdapat di sini  
2."Polimere DNA Phusion."Biolab New England. Terdapat di sini 

Ihsan gambar:

1.'Gam Illustrated oleh Nivin Nasri'by Nivinn - Kerja Sendiri, (CC BY -SA 4.0) melalui Commons Wikimedia  
2.'Taq'by adenosine - kerja sendiri, (cc by -sa 3.0) melalui Commons Wikimedia