Perbezaan antara PCR dan PCR masa nyata
The Perbezaan utama antara PCR dan PCR masa nyata Adakah PCR konvensional lebih memakan masa daripada PCR masa nyata kerana menggunakan elektroforesis gel untuk menganalisis produk PCR yang diperkuatkan.
Reaksi rantai PCR atau polimerase adalah penemuan revolusioner dalam biologi molekul moden, yang pertama kali dibangunkan oleh ahli kimia Kary Mullis pada tahun 1983. Ia membolehkan satu urutan dalam DNA kompleks dikuatkan untuk analisis.
Kandungan
1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apa itu PCR
3. Apa itu PCR masa nyata
4. PCR vs PCR masa nyata dalam bentuk jadual
5. Ringkasan - PCR vs PCR masa nyata
Apa itu PCR?
Idea asas tindak balas rantai PCR atau polimerase adalah bahawa dua primer, yang melengkapi dengan helai bertentangan dengan urutan DNA, berorientasikan ke arah satu sama lain; Primer menghasilkan helai pelengkap, masing -masing mengandungi primer yang lain. Oleh itu, hasilnya adalah kuantiti besar urutan yang sepadan dengan DNA yang terletak di antara kedua -dua primer. Enzim polimerase DNA digunakan untuk memperluaskan primer dalam PCR. Polimerase DNA adalah enzim termostable, dan ia mempunyai keupayaan untuk bertahan dalam suhu tinggi (94 hingga 95 ° C) yang digunakan untuk denaturasi DNA templat.
PCR melibatkan tiga langkah, iaitu, pusingan denaturasi, penyepuhlindapan primer, dan sintesis DNA. Mesin Thermocycler digunakan untuk melakukan tindak balas ini supaya dapat diprogramkan untuk mengubah suhu dengan cepat dan tepat. Aplikasi PCR termasuk penyiasatan jenayah, cap jari DNA, pengesanan patogen, dan analisis DNA spesies manusia awal.
Apa itu PCR konvensional?
Terdapat tiga peringkat utama PCR konvensional: Tahap penguatan DNA, pemisahan PCR, dan pengesanan produk. Pemisahan segmen DNA biasanya dilakukan oleh elektroforesis gel agarose. Produk kemudiannya bernoda dengan etidium bromida. Akhirnya, pengesanan dicapai dengan visualisasi band ke gel di bawah cahaya UV. Oleh itu, keputusan akhir PCR konvensional tidak dinyatakan sebagai nombor. Biasanya PCR konvensional hanya dapat mengesan parameter tunggal.
Apa itu PCR masa nyata?
PCR masa nyata dapat mengesan penguatan produk, kerana produk disintesis. Dengan perkembangan teknologi, PCR telah menjadi teknik yang sangat popular, terutamanya untuk pengesanan dan pengenalan bakteria dalam makanan. PCR masa nyata menggunakan sistem pewarna pembasahan dan termosik yang dilengkapi dengan keupayaan pengesanan pendarfluor.
Apakah perbezaan antara PCR dan PCR masa nyata?
Perbezaan utama antara PCR dan PCR masa nyata adalah bahawa PCR konvensional lebih banyak memakan masa kerana menggunakan elektroforesis gel untuk menganalisis produk PCR yang diperkuatkan sementara PCR masa nyata kurang memakan masa kerana ia dapat mengesan amplifikasi semasa fasa awal dari fasa awal tindak balas. PCR masa nyata mengumpul data pada fasa pertumbuhan eksponen PCR manakala PCR tradisional mengumpul data pada titik akhir reaksi. Selain itu, hasil akhir PCR konvensional mungkin tidak begitu tepat, tetapi hasil PCR masa nyata sangat tepat. Di samping itu, PCR masa nyata lebih sensitif daripada PCR konvensional.
Tambahan pula, PCR konvensional mempunyai resolusi yang sangat buruk sementara PCR masa nyata dapat mengesan sedikit perubahan kerana resolusi tinggi. Di samping. Juga, tidak seperti PCR konvensional, teknik pengesanan automatik ditemui dalam PCR masa nyata. PCR konvensional lebih canggih dan intensif buruh daripada PCR masa nyata. Tidak seperti PCR masa nyata, PCR konvensional tidak dapat mendiskriminasi antara bakteria mati dan hidup. Selain itu, PCR masa nyata menggunakan sistem pewarna pendarfluor untuk mengesan produk sementara PCR konvensional menggunakan cahaya etidium bromida dan UV untuk memvisualisasikan band dalam medium gel agarose.
Infographic di bawah membentangkan perbezaan antara PCR dan PCR masa nyata dalam bentuk tabular untuk perbandingan bersebelahan.
Ringkasan -PCR vs PCR masa nyata
Perbezaan utama antara PCR dan PCR masa nyata ialah PCR konvensional lebih banyak memakan masa daripada PCR masa nyata kerana ia menggunakan elektroforesis gel untuk menganalisis produk PCR yang diperkuatkan. Selain itu, PCR masa nyata menggunakan sistem pewarna pendarfluor untuk mengesan produk sementara PCR konvensional menggunakan cahaya etidium bromida dan UV untuk memvisualisasikan band dalam medium gel agarose.
Ihsan gambar:
1. "Reaksi rantai polimerase-en" oleh enzoklop-kerja sendiri (CC by-sa 4.0) melalui Commons Wikimedia
