Perbezaan utama antara HPLC dan HPTLC ialah HPLC membolehkan pemisahan kuantitatif komponen dalam sampel sedangkan HPTLC tidak membenarkan pemisahan kuantitatif komponen dalam sampel.
Kromatografi adalah kaedah pemisahan fizikal yang digunakan untuk memisahkan dan mengenal pasti komponen dalam campuran. Kedua -dua HPLC dan HPTLC adalah teknik kromatografi. HPLC adalah kromatografi cecair prestasi tinggi. HPTLC adalah kromatografi lapisan nipis prestasi tinggi.
1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apa itu HPLC
3. Apa itu HPTLC
4. Perbandingan sampingan - HPLC vs HPTLC dalam bentuk jadual
5. Ringkasan
HPLC adalah Kromatografi cecair berprestasi tinggi. Ini adalah teknik analisis yang digunakan untuk memisahkan, mengenal pasti dan mengukur komponen dalam campuran. Dalam teknik ini, sampel dibubarkan dalam pelarut yang sesuai. Kemudian pelarut dengan sampel dilalui melalui pam dengan tekanan yang diberikan. Pam dipenuhi dengan bahan penyerap pepejal. Kemudian beberapa komponen mengikat kuat ke bahan penyerap manakala komponen lain mengikat longgar. Ini menyebabkan komponen mempunyai kadar aliran yang berbeza melalui pam. Oleh itu, komponen dapat dipisahkan dengan mudah.
Rajah 01: Sistem HPLC
Bahan penyerap yang mengisi pam itu dikenali sebagai Fasa pegun. Pelarut dengan sampel terlarut dikenali sebagai fasa mudah alih. Pam yang digunakan dalam teknik ini dipanggil lajur. Lajur dipenuhi dengan bahan penyerap, paling biasa, zarah silika. Saiz zarah ini mungkin berkisar dari 2-50 μm. Proses pemisahan dipengaruhi oleh komposisi fasa mudah alih dan suhu sistem. Interaksi antara fasa pegun dan komponen dalam sampel boleh menjadi interaksi hidrofobik, interaksi dipole-dipole, ikatan ionik, dan lain-lain.
Tekanan operasi HPLC jauh lebih tinggi daripada kromatografi cecair tradisional. Ia terletak sekitar 50-350 bar. Perbezaan antara kromatografi cecair dan HPLC ialah dalam kromatografi cecair, sampel jatuh melalui lajur di bawah graviti sedangkan, dalam HPLC, sampel ditekan melalui lajur. Saiz lajur dan zarah penyerap juga sangat kecil jika dibandingkan dengan kromatografi cecair tradisional. Walau bagaimanapun, resolusi yang diberikan oleh teknik HPLC lebih unggul.
HPTLC adalah kromatografi lapisan nipis prestasi tinggi. Ia adalah bentuk TLC tradisional yang maju dan automatik. Teknik ini memberikan resolusi yang cekap pada masa yang singkat. Dalam kaedah analisis ini, sampel dan rujukan boleh dianalisis pada masa yang sama, yang membolehkan sampel dibandingkan dengan rujukan. Ia memberikan ketepatan analisis yang lebih baik daripada teknik kromatografi lain. Masa yang diambil untuk analisis kurang. Teknik ini adalah teknik kos rendah.
Rajah 02: Analisis pewarna makanan menggunakan HPTLC
Kaedah HPTLC adalah proses yang mudah, dan langkah penyediaan sampel juga dihapuskan (dalam TLC tradisional, langkah penyediaan sampel dimasukkan sebelum pemisahan. Langkah ini melibatkan pembersihan dan pengayaan). Pelarut boleh digunakan secara langsung tanpa rawatan pra-rawatan walaupun teknik kromatografi lain memerlukan pra-rawatan seperti degassing, penapisan, dan lain-lain.
Bahan penyerap yang digunakan dalam HPTLC adalah silika dengan saiz zarah yang sangat kecil. Dalam TLC tradisional, saiz zarah silika adalah 5-20 μm sedangkan, dalam HPTLC, ia adalah 4-8 μm. Sampel digunakan pada plat HPTLC menggunakan aplikator. Ia memberikan aplikasi seragam dan selamat. Kemudian plat diletakkan di dalam ruang yang mempunyai fasa mudah alih. Ruang harus tepu dengan wap fasa mudah alih. Selepas proses HPTLC, bintik -bintik yang telah dipindahkan dapat dikesan. Semasa mengesan bintik -bintik di atas pinggan, teknik HPTLC menggunakan rantau UV yang sesuai atau ruang iodin.
HPLC vs HPTLC | |
HPLC adalah kromatografi cecair prestasi tinggi. | HPTLC adalah kromatografi lapisan nipis prestasi tinggi. |
Teknik | |
Di HPLC, fasa mudah alih dengan pelarut dilalui melalui lajur yang dipenuhi dengan fasa pegun. | Dalam HPTLC, sampel dilihat pada plat TLC dan diletakkan di dalam ruang yang mengandungi fasa mudah alih; maka sampel dibenarkan untuk berhijrah ke atas plat bersama dengan fasa mudah alih. |
Pengukuran | |
Dalam HPLC, perbezaan antara kadar aliran komponen melalui lajur digunakan untuk memisahkan komponen dalam sampel. | Di HPTLC, perbezaan antara jarak yang dilalui oleh setiap komponen dalam sampel digunakan untuk memisahkan komponen dalam sampel. |
Pemisahan kuantitatif | |
HPLC membolehkan pemisahan kuantitatif komponen dalam sampel. | HPTLC tidak membenarkan pemisahan kuantitatif komponen dalam sampel. |
HPLC dan HPTLC adalah dua teknik kromatografi. Perbezaan utama antara HPLC dan HPTLC ialah HPLC membolehkan pemisahan kuantitatif komponen dalam sampel sedangkan HPTLC tidak membenarkan pemisahan kuantitatif komponen dalam sampel.
1. "Kromatografi cecair berprestasi tinggi."Wikipedia, Yayasan Wikimedia, 10 Apr. 2018, boleh didapati di sini.
2. "HPTLC."LinkedIn Slideshare, 30 Mei 2011, boleh didapati di sini.
1. "Hptlcplatetoms" oleh Kjaergaard di Wikipedia Inggeris - dipindahkan dari en.Wikipedia ke Commons (Domain Awam) melalui Commons Wikimedia
2. "HPLC" oleh PD Dr. rer. nat. habil. Profesor Gertrud Morlockassociate (Privatdozentin) Universiti Hohenheiminstitute of Food Chemistry - G. Morlock, c. OELLIG, CAMAG BIBLIOGRAFI PERKHIDMATAN 103 (2009) melalui Commons Wikimedia