Perbezaan antara alpha BL21 dan DH5

Perbezaan antara alpha BL21 dan DH5

The Perbezaan utama antara alpha BL21 dan DH5 Adakah BL21 adalah kompeten kejuruteraan genetik yang tidak berprofisi protease E. coli Sel yang digunakan terutamanya untuk ekspresi protein, manakala DH5 Alpha adalah kompeten kejuruteraan genetik E. coli Sel dengan mutasi RecA1 digunakan terutamanya untuk transformasi plasmid.

E. coli adalah salah satu organisma pilihan yang terkenal untuk pengeluaran protein rekombinan. Ia telah menjadi platform ekspresi yang paling popular selama bertahun -tahun. Ia juga digunakan sebagai kilang sel. BL21 dan DH5 Alpha adalah dua kejuruteraan genetik E. coli Sel yang kini digunakan untuk ekspresi protein dan transformasi plasmid.

Kandungan

1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apa itu BL21  
3. Apa itu DH5 Alpha
4. Persamaan - BL21 dan DH5 Alpha
5. BL21 vs DH5 Alpha dalam bentuk jadual
6. Ringkasan - BL21 vs DH5 Alpha

Apa itu BL21?

BL21 adalah kompeten kejuruteraan genetik yang tidak berprofisi protease E .coli sel terutamanya digunakan untuk ungkapan protein. E. coli BL21 adalah sel bakteria yang diperolehi dari ketegangan B. Ia mempunyai kecacatan protease lon dan mengikat protease membran luar. Ia biasanya digunakan untuk ekspresi protein rekombinan kerana biasanya membawa kestabilan untuk menyatakan protein. BL21 berguna untuk ekspresi protein dengan DNA PCOLD I-IV dan PCOLD TF DNA. Tetapi ini kompeten E. coli Sel tidak dimaksudkan untuk sistem ekspresi protein menggunakan promoter T7 seperti sistem haiwan kesayangan. Sebab di sebalik ini adalah BL21 tidak menyatakan polimerase T7 RNA. Di samping itu, tidak disyorkan untuk digunakan untuk pembinaan atau penyediaan plasmid kerana ia tidak mempunyai mutasi recA.

Rajah 01: BL21

BL21 pertama kali diterangkan oleh Studier pada tahun 1986 selepas pelbagai pengubahsuaian garis B. Sel BL21 kekurangan protease LON, yang merendahkan banyak protein asing. Tambahan pula, hilang gen lain yang kod untuk protease membran luar (ompt) yang fungsinya adalah merendahkan protein ekstraselular. Kekurangan protein ini mencetuskan kejayaan pengeluaran protein asing di E. coli Sel BL21. Tambahan pula, mutasi HSDSB dalam sel -sel ini menghalang metilasi DNA asing dan gangguan dalam sel BL21.

Apa itu DH5 Alpha?

DH5 Alpha adalah kompeten kejuruteraan genetik E. coli sel dengan mutasi RecA1 yang digunakan terutamanya untuk transformasi plasmid. DH5 Alpha E. coli Sel -sel secara genetik direkayasa oleh ahli biologi Amerika Douglas Hanahan untuk memaksimumkan kecekapan transformasi. Dh5 Alpha Cell mempunyai tiga mutasi yang berbeza: RecA1, EndA1, dan LaczΔM15. RecA1 adalah mutasi titik tunggal yang menggantikan gliserin 160 dengan dan residu asid aspartik dalam polipeptida RecA. Mutasi ini melumpuhkan aktiviti rekombinase dan tidak mengaktifkan penggabungan homolog. mutasi enda1 tidak mengaktifkan endonuclease intraselular yang menghalangnya daripada merendahkan plasmid yang dimasukkan.

Rajah 02: DH5 Alpha

Selain itu, mutasi laczΔm15 membolehkan pemeriksaan biru-putih sel berubah. Sel -sel ini adalah sel yang kompeten. Mereka sering digunakan dengan transformasi kalsium klorida untuk memasukkan plasmid yang dikehendaki. Ia dikenal pasti oleh penyelidikan baru -baru ini bahawa sel alpha DH5 dengan kaedah Hanahan adalah sel yang paling cekap untuk transformasi plasmid.

Apakah persamaan antara alpha BL21 dan DH5?

  • BL21 dan DH5 Alpha adalah dua kejuruteraan genetik E .coli
  • Kedua -duanya adalah sel yang kompeten.
  • Mereka terdiri daripada mutasi yang berbeza.
  • Kedua -duanya tidak mempunyai habitat semula jadi.
  • Ini digunakan untuk tujuan makmal seperti kajian ekspresi dan prosedur pengklonan.

Apakah perbezaan antara alpha BL21 dan DH5?

BL21 adalah kompeten kejuruteraan genetik yang tidak berprofisi protease E. coli sel terutamanya digunakan untuk ungkapan protein. Sebaliknya, DH5 Alpha adalah kompeten kejuruteraan genetik E. coli sel dengan mutasi RecA1 terutamanya digunakan untuk transformasi plasmid. Jadi, ini adalah perbezaan utama antara alpha BL21 dan DH5. Tambahan pula, BL21 E. coli Sel tidak mempunyai mutasi RecA1, sementara Dh5 Alpha E. coli sel mempunyai mutasi RecA1.

Infographic berikut menyenaraikan perbezaan antara alpha BL21 dan DH5 dalam bentuk jadual.

Ringkasan -BL21 vs DH5 Alpha

Ketegangan bukan patogen E. coli dibangunkan secara genetik oleh saintis untuk kajian ekspresi makmal dan tujuan pengklonan. BL21 dan DH5 Alpha adalah dua kejuruteraan genetik E. coli sel. BL21 digunakan terutamanya untuk kajian ekspresi protein. Sebaliknya, DH5 Alpha digunakan terutamanya untuk tujuan transformasi plasmid. Oleh itu, ini adalah ringkasan perbezaan antara alpha BL21 dan DH5.

Rujukan:

1. "BL21 Kompeten E. Coli."New England Biolabs: Reagen untuk Industri Sains Hayat.
2. "DH5-alpha Kimia Kimia E. Sel coli."Goldbio.

Ihsan gambar:

1. "Analisis-dari-manusia-cytomegalovirus-encoded-sumo-target-dan-temporal-regulation-of-sumoylation-of-pone.0103308.G001 "oleh Kim E, Kim Y, Kim Y, Lee M, Hayward G, Ahn J-" Analisis sasaran sumo sitomegalovirus manusia dan pengawalan temporal sumoylation protein-protein yang terdekat IE1 dan IE2 semasa infeksi "Plos satu. Doi: 10.1371/Jurnal.panda.0103308. PMID 25050850. PMC: 4106884 (CC oleh 4.0) melalui Commons Wikimedia
2. "Koloni DH5-alpha yang tumbuh di atas pinggan amp" oleh Balapagos (CC BY-SA 2.0) melalui Flickr