Perbezaan antara BCA dan Bradford Assay

The Perbezaan utama antara BCA dan Bradford Assay adalah bahawa ujian BCA memakan masa dan kurang tepat, sedangkan ujian Bradford cepat dan tepat.

BCA dan Bradford Assay adalah dua kaedah ujian penentuan kepekatan protein. Kedua -dua ujian ini mempunyai prinsip ujian dan perbezaan yang berbeza dalam ketepatan mereka.

Kandungan

1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apa itu BCA Assay
3. Apa itu Bradford Assay
4. BCA vs Bradford Assay dalam bentuk jadual
5. Ringkasan - BCA vs Bradford Assay

Apa itu BCA Assay?

Assay BCA atau asid asid bicinchoninic adalah ujian biokimia yang berguna dalam menentukan jumlah kepekatan protein dalam larutan. Kaedah ini juga dinamakan sebagai Smith assay Selepas penciptanya, Paul K. Smith. Kaedah analisis ini menunjukkan persamaan dengan ujian protein Lowry, ujian protein Bradford atau reagen biuret. Kita dapat melihat jumlah kepekatan protein dalam sampel yang diberikan melalui perubahan warna penyelesaian sampel, yang pergi dari hijau ke ungu. Perubahan warna ini berlaku mengikut kadar kandungan protein. Selepas itu kita boleh menggunakan teknik colourimetric untuk menganalisis intensiti warna dan kandungan protein dalam sampel.

Kaedah anggaran protein BCA

Apabila mempertimbangkan mekanisme ujian BCA, penyelesaian BCA tipikal mengandungi penyelesaian yang sangat alkali dengan pH hampir kira -kira 11.25, dan bahan -bahan dalam penyelesaian ini termasuk asid bicinchoninic, natrium karbonat, natrium bikarbonat, natrium tartrate, dan tembaga (II) sulfat pentahydrate. Ujian ini terutamanya bergantung kepada dua tindak balas kimia: pengurangan tembaga (ii) ke tembaga (i) oleh ikatan peptida dalam protein dan chelation dua molekul asid bicinchoninic dengan tembaga (i) ion, mengakibatkan kompleks berwarna ungu yang dapat menyerap cahaya pada panjang gelombang 562 nm. Dalam tindak balas pertama, jumlah tembaga (ii) dikurangkan oleh bon peptida adalah berkadar dengan jumlah protein dalam sampel.

Apa itu Bradford Assay?

Bradford Assay adalah kaedah analisis spektroskopi yang berguna dalam mengukur kepekatan protein dalam penyelesaian. Kaedah ini dibangunkan oleh Marion m. Bradford pada tahun 1976, dan ia adalah kaedah yang agak cepat dan tepat.

Reaksi warna protein dan reagen Bradford

Kita boleh menggunakan kaedah ini untuk menentukan kepekatan jumlah protein dalam sampel. Reaksi kimia yang berlaku dalam sampel semasa ujian ini hanya bergantung kepada komposisi asid amino protein dalam sampel.

Kaedah anggaran protein Bradford

Apabila mempertimbangkan kaedah ujian ini, ia adalah ujian protein kolourimetrik yang berdasarkan peralihan penyerapan pewarna bernama Coomassie Brilliant Blue G-250. Umumnya, pewarna ini wujud dalam tiga bentuk sebagai bentuk anionik (biru), bentuk neutral (hijau) dan bentuk kationik (merah). Oleh itu, di bawah keadaan berasid, pewarna mengubah warna dari merah ke biru. Ini kerana mengikat protein dengan pewarna. Sebaliknya, jika tidak ada protein untuk mengikat dengan pewarna, perubahan warna tidak muncul, penyelesaiannya mendapat warna merah coklat. Pewarna ini mampu membentuk kompleks yang kuat dan tidak berkesudahan dengan kumpulan karboksil protein melalui daya van der Waal dan tarikan elektrostatik.

Apakah perbezaan antara BCA dan Bradford Assay?

BCA dan Bradford Assay adalah dua kaedah ujian penentuan kepekatan protein. Kedua -dua ujian ini mempunyai prinsip ujian dan perbezaan yang berbeza dalam ketepatan mereka. Perbezaan utama antara BCA dan Bradford Assay ialah ujian BCA adalah memakan masa dan kurang tepat, sedangkan ujian Bradford cepat dan tepat.

Infographic berikut meringkaskan perbezaan antara BCA dan Bradford Assay dalam bentuk jadual.

Ringkasan -BCA vs Bradford Assay

Assay asid BCA atau asid bicinchoninic adalah ujian biokimia yang berguna dalam menentukan jumlah kepekatan protein dalam larutan. Bradford Assay adalah kaedah analisis spektroskopi yang berguna dalam mengukur kepekatan protein dalam penyelesaian. Perbezaan utama antara BCA dan Bradford Assay ialah BCA memakan masa dan kurang tepat, sedangkan ujian Bradford cepat dan tepat.

Rujukan:

1. "Ujian Protein Bradford."Biosains Eksperimen, Rice University.

Ihsan gambar:

1. "Bradford Protein Assay" oleh Helito - Kerja Sendiri (CC BY -SA 4.0) melalui Commons Wikimedia
2. "BSA Standard Curve" oleh Alexieogo - Kerja Sendiri (CC BY -SA 4.0) melalui Commons Wikimedia