Elektroforesis gel adalah teknik yang memisahkan makromolekul dalam medan elektrik. Ini adalah kaedah biasa dalam biologi molekul untuk memisahkan DNA, RNA dan protein dari campuran mengikut saiz molekul mereka. Halaman SDS adalah jenis elektroforesis gel yang digunakan untuk memisahkan protein dari campuran protein berdasarkan saiz mereka. Elektroforesis gel adalah istilah yang digunakan untuk merujuk kepada teknik biasa yang digunakan untuk pemisahan DNA, RNA, dan protein manakala Halaman SDS adalah satu jenis elektroforesis gel. Ini adalah perbezaan utama antara elektroforesis gel dan halaman SDS.
Kandungan
1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apakah elektroforesis gel
3. Apa itu halaman SDS
4. Perbandingan sampingan - Gel Electrophoresis vs SDS Page
5. Ringkasan
Elektroforesis gel adalah teknik biasa yang digunakan di makmal untuk memisahkan molekul yang dikenakan seperti DNA, RNA, protein, dll. dari campuran mereka. Gel digunakan dalam elektroforesis gel. Ia bertindak sebagai penapis molekul. Terdapat dua jenis gel yang digunakan dalam elektroforesis gel iaitu agarose dan polyacrylamide. Pemilihan gel dan penyediaan gel adalah faktor penting yang perlu dipertimbangkan dalam elektrofores gel kerana saiz liang gel perlu dimanipulasi dengan teliti untuk pemisahan molekul yang baik melalui elektroforesis gel. Elektroforesis gel mempunyai medan elektrik yang disambungkan ke dua hujung gel. Satu hujung gel menunjukkan caj positif manakala hujung yang lain dicas secara negatif.
DNA dan RNA molekul negatif. Sebaik sahaja mereka dimuatkan ke dalam gel dari ujung negatif gel dan digunakan ke medan elektrik, mereka berhijrah melalui liang gel ke arah ujung gel yang positif. Kelajuan penghijrahan bergantung pada caj dan saiz molekul. Molekul yang lebih kecil dengan mudah berhijrah melalui liang gel daripada molekul yang lebih besar. Oleh itu, molekul yang lebih kecil bergerak jarak jauh melalui gel dan molekul yang lebih besar bergerak jauh. Untuk memerhatikan perjalanan molekul di gel, jenis pewarna khas digunakan. Medan elektrik digunakan untuk tempoh masa tertentu dan berhenti untuk mengelakkan kehilangan molekul dan untuk menjaga molekul di kedudukan mereka yang mengembara. Band yang berbeza dapat diperhatikan di gel. Band ini mewakili molekul saiz yang berbeza. Oleh itu, elektroforesis gel berguna untuk membezakan molekul mengikut saiz mereka.
Elektroforesis gel dimasukkan ke dalam pelbagai teknik sebagai teknik preparatif dalam biologi molekul seperti PCR, RFLP, pengklonan, penjujukan DNA, pembengkakan selatan, pemetaan genom, dan lain -lain.
Rajah 01: Elektroforesis gel agarose
Elektroforesis gel polyacrylamide natrium dodecil sulfat (Halaman SDS) adalah sejenis elektroforesis gel yang digunakan untuk memisahkan protein. Apabila elektroforesis gel digunakan untuk memisahkan protein, rawatan khas diperlukan kerana protein tidak dikenakan secara negatif seperti DNA dan RNA dan tidak berhijrah ke arah akhir positif atau akhir negatif. Oleh itu, protein dikhususkan dan dilapisi dengan caj negatif sebelum elektroforesis gel. Ia dilakukan dengan menggunakan detergen yang disebut natrium dodecyl sulfate (SDS). Elektroforesis gel yang menggunakan SDS dan gel polyacrylamide untuk medium sokongan dikenali sebagai halaman SDS. Teknik ini biasanya digunakan dalam biokimia, genetik, forensik dan biologi molekul.
Semasa halaman SDS, protein bercampur dengan SDS. SD membentangkan protein ke dalam bentuk linear dan melapisi mereka dengan cas negatif berkadar dengan jisim molekul mereka. Oleh kerana caj negatif, molekul protein berhijrah ke arah ujung caj positif gel dan memisahkan mengikut massa molekul mereka. Di halaman SDS, polyacrylamide digunakan sebagai sokongan pepejal untuk gel. Pemisahan sebenar protein terutamanya bergantung kepada sifat gel. Oleh itu, penyediaan gel polyacrylamide harus dilakukan dengan teliti dan kepekatan polyacrylamide yang betul harus digunakan. Gel polyacrylamide menunjukkan resolusi tinggi daripada gel agarose. Oleh itu, halaman SDS dianggap sebagai teknik resolusi tinggi untuk pemisahan protein.
Halaman SDS adalah jenis elektroforesis gel denaturing. Ia mempunyai batasan utama dalam analisis protein. Oleh kerana protein SDS Denatures Sebelum pemisahan, ia tidak membenarkan pengesanan aktiviti enzimatik, interaksi mengikat protein, cofactor protein, dan lain -lain.
Rajah 02: Halaman SDS
Elektroforesis gel vs halaman SDS | |
Elektroforesis gel adalah kaedah yang dilakukan untuk memisahkan makromolekul menggunakan medan elektrik. | Halaman SDS adalah teknik elektroforesis gel resolusi tinggi yang digunakan untuk memisahkan protein berdasarkan jisim mereka. |
Gel Run | |
Ia dapat dilakukan secara mendatar atau menegak. | Halaman SDS selalu berjalan secara menegak. |
Asas untuk pemisahan | |
Pemisahan berlaku mengikut caj dan saiz. | Pemisahan protein berlaku mengikut jisim dan caj. |
Resolusi | |
Elektroforesis gel agarose mempunyai resolusi rendah dan elektroforesis gel polyacrylamide mempunyai resolusi yang lebih tinggi | Halaman SDS mempunyai resolusi yang lebih baik. |
Denaturasi | |
Elektroforesis gel merangkumi kedua -dua teknik denaturing dan bukan denaturing. | Protein Halaman SDS Protein Sebelum Pemisahan. |
Elektroforesis gel adalah teknik biasa yang digunakan untuk pemisahan dan analisis DNA, RNA dan protein berdasarkan saiz dan caj mereka. Terdapat dua jenis utama elektroforesis gel iaitu elektroforesis gel agarose dan elektroforesis gel polyacrylamide. Gel agarose digunakan terutamanya untuk pemisahan asid nukleik; Apabila resolusi yang lebih tinggi diperlukan, gel polyacrylamide digunakan. Halaman SDS adalah jenis elektroforesis gel yang biasa digunakan untuk memisahkan campuran kompleks protein. Ia dianggap sebagai teknik pemisahan protein resolusi tinggi. Ini adalah perbezaan antara elektroforesis gel dan halaman SDS.
Rujukan:
1. Nowakowski, Andrew B., William j. Wobig, dan David H. Petering. "SDS-PAGE Asli: Pemisahan Elektroforetik Resolusi Tinggi Protein dengan Pengekalan Sifat Asli termasuk ion logam terikat. www.NCBI.NLM.NIH.gov. N.p., Mei 2014. Web. 7 Apr. 2017
2. Stellwagen, Nancy C. "Elektroforesis DNA dalam gel agarose, gel polyacrylamide dan penyelesaian percuma."Elektroforesis. U.S. Perpustakaan Perubatan Negara, Jun 2009. Web. 07 Apr. 2017
Ihsan gambar:
1. "Gelelektrophoreseapparatur" (CC BY-SA 3.0) melalui Commons Wikimedia
2. "Elektroforesis Gel Agarose DNA" oleh Sekolah Sumber Asli dari Ann Arbor - Lab DNA (CC oleh 2.0) melalui Commons Wikimedia